Revvity, 64PLKTPEH, kit de detección de PLK1 total humano HTRF, 10 000 puntos de ensayo

Descripción general
Este ensayo celular HTRF permite la detección rápida y cuantitativa de la proteína PLK1 total (fosforilada o no). La quinasa tipo Polo 1 (PLK1) es el miembro principal de la familia de las serina/treonina quinasas, bien conservadas, y es esencial para la división celular (mitosis). Por lo tanto, es un regulador clave del punto de control G2/M del ciclo celular.
Activación de PLK1 para la regulación del ciclo celular: PLK1 se activa mediante fosforilación en Thr210 por la quinasa AurA. La PLK1 activada fosforila CDC25.
PLK1 es una proteína crucial responsable de la mitosis y la progresión del ciclo celular/proliferación celular. Esto la convierte en un objetivo atractivo para el tratamiento del cáncer.
Cómo funciona
Principio del ensayo de PLK1 total
El ensayo Total-PLK1 cuantifica el nivel de expresión de PLK1 en un lisado celular. A diferencia del Western Blot, este ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo Total-PLK1 utiliza dos anticuerpos marcados: uno acoplado a un fluoróforo donante y el otro a un aceptor. Ambos anticuerpos son altamente específicos para un epítopo específico de la proteína. En presencia de PLK1 en un extracto celular, la adición de estos conjugados acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de la proteína presente en la muestra y permite evaluar la expresión de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de dos placas de PLK1 total
El protocolo de dos placas consiste en cultivar las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y, posteriormente, transferir los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección Total-PLK1 HTRF. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa de PLK1 total
La detección de PLK1 total con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado.
Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis 1, tampón de lisis 2, tampón de lisis 3, tampón de lisis 4
Modificación molecular total
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: humanos
Tecnología-TR-FRET
Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo