Revvity, 64RETYPEG, kit de detección de fosforilación HTRF humana y de ratón (Pan-Tyr), 500 puntos de ensayo

Descripción general
El ensayo celular HTRF Phospho-RET (pan) detecta de forma cómoda y precisa el RET fosforilado en residuos de tirosina. El ensayo mide las isoformas de RET cortas y largas.
El protooncogén RET (Reordenado durante la Transfección), también conocido como c-Ret, es un receptor de tirosina quinasa que se expresa principalmente en dos isoformas de 1072 y 1114 aminoácidos. La activación de RET por los ligandos neurotróficos de la familia (GFL) derivados de la línea celular glial conduce a su dimerización y autofosforilación en residuos intracelulares de tirosina. RET es necesario para el desarrollo del sistema nervioso y de otros tejidos. Se han detectado alteraciones de RET en numerosos cánceres humanos. Por lo tanto, el desarrollo de inhibidores de RET quinasa altamente selectivos y potentes resulta de gran interés para el tratamiento de cánceres con alteraciones de RET. Recientemente, RET también se ha vinculado a la neurodegeneración.
Cómo funciona
Principio del ensayo de fosfo-RET (pan)
El ensayo Phospho-RET (pan) mide la RET cuando se fosforila en tirosinas. A diferencia del Western Blot, este ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo utiliza dos anticuerpos: uno marcado con un fluoróforo donante y el otro con un aceptor. El primer anticuerpo se selecciona por su unión específica a los residuos de tirosina fosforilados, mientras que el segundo por su capacidad para reconocer específicamente la proteína independientemente de su estado de fosforilación. La fosforilación de la proteína permite la formación de un inmunocomplejo que involucra a ambos anticuerpos marcados, lo que acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de proteína fosforilada presente en la muestra y permite evaluar el estado de fosforilación de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de dos placas de fosfo-RET (pan)
El protocolo de dos placas consiste en cultivar las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y, posteriormente, transferir los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección Phospho-RET (pan) HTRF. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa de fosfo-RET (pan)
La detección de RET fosforilado (pan) con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Compatible con automatización: Sí
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis 1, tampón de lisis 2, tampón de lisis 3, tampón de lisis 4
Modificación molecular-fosforilación
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: ratón humano
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica - Oncología e Inflamación
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo