Revvity, 64RSK1S0PEH, kit de detección de fosforilación RSK1 (Ser380) humana y de ratón HTRF, 10 000 puntos de ensayo

Descripción general
El kit celular Phospho-RSK1 (S380) está diseñado para la cuantificación robusta de RSK1 fosforilada directamente mediante un protocolo optimizado de mezcla y lectura, sin lavado. La RSK1 desempeña un papel fundamental en la proliferación y diferenciación celular. Este kit se puede utilizar desde la investigación básica hasta el cribado de fármacos de alto rendimiento. Su versatilidad lo hace adecuado para diversas aplicaciones, desde la investigación básica hasta el análisis de cuestiones farmacológicas en modelos celulares.
Los ensayos HTRF ofrecen muchas ventajas sobre otras tecnologías:

Formato homogéneo de adición y lectura
Sin pasos de lavado
Fondo bajo
Miniaturización sencilla desde microplacas de 96 o 384 pocillos a formatos de ensayo de alta densidad, como placas de 384 pocillos de bajo volumen y de 1536 pocillos.
Señal estable, que proporciona flexibilidad en el tiempo de lectura o tamaño de los ensayos.
Cómo funciona
Principio del ensayo de fosfo-RSK1 (S380)
El ensayo Phospho-RSK1 (S380) mide la fosforilación de RSK1 en la serina 380. A diferencia del Western Blot, este ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo Total RSK1 utiliza dos anticuerpos marcados: uno con un fluoróforo donante y otro con un aceptor. El primer anticuerpo se seleccionó por su unión específica al motivo fosforilado de la proteína, y el segundo por su capacidad de reconocer la proteína independientemente de su estado de fosforilación. La fosforilación de la proteína permite la formación de un inmunocomplejo que involucra a ambos anticuerpos marcados y que acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de proteína fosforilada presente en la muestra y permite evaluar el estado de fosforilación de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de 2 placas de fosforilación RSK1 (S380)
El protocolo de 2 placas implica el cultivo celular en una placa de 96 pocillos antes de la lisis. Posteriormente, los lisados ​​se transfieren a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección HTRF Phospho-RSK1 (S380). Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa de fosforilación RSK1 (S380)
La detección de Fosfo-RSK1 (S380) con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Compatible con automatización: Sí
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis 2
Modificación molecular-fosforilación
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: ratón humano
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica - Enfermedades infecciosas Metabolismo/Diabetes Oncología e inflamación Enfermedades raras
Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo