Revvity, 64SI1PEC, kit de detección de HTRF SIRT1, 20 000 puntos de ensayo

Descripción general
SIRT1 pertenece a la clase III de la familia de proteínas reguladoras de información silenciosa 2 (Sir2), que son histonas/proteínas desacetilasas (sirtuinas). El uso de moduladores de SIRT1 se ha descrito como una posible solución terapéutica para el tratamiento de diversas enfermedades, como el cáncer, la diabetes, el envejecimiento y las enfermedades neurodegenerativas, metabólicas o cardiovasculares. Este ensayo rápido y sencillo permite la discriminación de compuestos polifenólicos y puede utilizarse para el cribado de alto rendimiento para identificar tanto inhibidores como activadores de la actividad de SIRT1.
Los ensayos HTRF ofrecen muchas ventajas sobre otras tecnologías:

Formato homogéneo de adición y lectura
Sin pasos de lavado
Fondo bajo
Miniaturización sencilla desde microplacas de 96 o 384 pocillos a formatos de ensayo de alta densidad, como placas de 384 pocillos de bajo volumen y de 1536 pocillos.
Señal estable, que proporciona flexibilidad en el tiempo de lectura o tamaño de los ensayos.
Cómo funciona
Principio del ensayo
El ensayo HTRF SIRT1 utiliza un anticuerpo monoclonal específico antiacetilo marcado con Eu-criptato y un sustrato marcado con d2 acetilado. La señal máxima se obtiene en ausencia de SIRT1 y disminuye proporcionalmente al proceso de desacetilación. La cantidad de péptidos desacetilados se correlaciona directamente con la extinción de la señal.

Protocolo de ensayo
El ensayo consta de dos pasos: un paso enzimático seguido de un paso de detección universal. La enzima SIRT1 se incuba primero en presencia o ausencia de compuestos con el sustrato marcado con d2 acetilado. Se añade NAD+ para iniciar la reacción. A continuación, se añade el anticuerpo monoclonal marcado con Eu-criptato. El tampón de detección contiene EDTA y un inhibidor de SIRT (nicotinamida) para detener la detección enzimática. Aplicación: Ensayo enzimático bioquímico.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 10 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: epigenética
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica: Metabolismo/Diabetes, Neurociencia, Oncología e Inflamación
Tamaño de la unidad: 20.000 puntos de ensayo