Revvity, 64TIE2TPEH, kit de detección de Tie2 total humano HTRF, 10 000 puntos de ensayo

Descripción general
El kit de análisis celular Total Tie2 está diseñado para monitorizar el nivel de expresión de Tie2, ya sea fosforilada o no. Es compatible con nuestro kit Phospho-Tie2 y permite el análisis de proteínas fosforiladas y totales de una sola muestra para una mejor lectura de la vía de señalización angiopoyetina/Tie2.
Tie2 es una tirosina-proteína quinasa presente en las células endoteliales y que funciona como receptor de superficie celular para las angiopoyetinas. Desempeña un papel clave en la regulación de la angiogénesis, la migración celular, la supervivencia, la adhesión y la proliferación, siendo su función principal mantener la estabilidad y la quiescencia vascular.
Cómo funciona
Principio del ensayo Total Tie2
El ensayo Total Tie2 cuantifica el nivel de expresión de Tie2 en un lisado celular. A diferencia del Western Blot, este ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo Total Tie2 utiliza dos anticuerpos marcados, uno acoplado a un fluoróforo donante y el otro a un aceptor. Ambos anticuerpos son altamente específicos para un epítopo específico de la proteína. En presencia de Tie2, esto permite la formación de un inmunocomplejo que involucra a ambos anticuerpos marcados, lo que acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET.
Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de proteína total presente en la muestra y proporciona un medio para evaluar el estado de fosforilación de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de dos placas Total Tie2
El protocolo de dos placas consiste en cultivar las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y, posteriormente, transferir los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección HTRF Total Tie2. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa Total Tie2
La detección de Tie2 total con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis 1
Modificación molecular total
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Objetivo-Tie2
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: humanos
Tecnología-TR-FRET
Área Terapéutica-Oncología
Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo