Revvity, 64YESTPEG, kit de detección de YES total humano HTRF, 500 puntos de ensayo

Descripción general
YES, también conocida como YES1, perteneciente a la familia de quinasas Src, es un protooncogén y una tirosina quinasa no receptora localizada en la membrana plasmática. Una vez activada, YES fosforila diversos efectores posteriores, como LATS1/2, YAP, FAK, caveolina-1 y p130CAS, así como Crk. Esta quinasa contribuye a una amplia gama de procesos celulares, como la proliferación celular, la supervivencia, la reorganización del citoesqueleto, la migración y la adhesión. La desregulación de YES puede contribuir a la aparición de afecciones patológicas, especialmente en el contexto del cáncer.
Los ensayos HTRF ofrecen muchas ventajas sobre otras tecnologías:

Formato homogéneo de adición y lectura
Sin pasos de lavado
Fondo bajo
Miniaturización sencilla desde microplacas de 96 o 384 pocillos a formatos de ensayo de alta densidad, como placas de 384 pocillos de bajo volumen y de 1536 pocillos.
Señal estable, que proporciona flexibilidad en el tiempo de lectura o tamaño de los ensayos.
Cómo funciona
Principio del ensayo Total YES

El ensayo Total YES cuantifica el nivel de expresión de YES en un lisado celular. A diferencia del Western Blot, este ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo Total YES utiliza dos anticuerpos marcados, uno acoplado a un fluoróforo donante y el otro a un aceptor. Ambos anticuerpos son altamente específicos para un epítopo específico de la proteína. En presencia de YES en un extracto celular, estos conjugados acercan el fluoróforo donante al aceptor, generando una señal de FRET. La intensidad de la señal es directamente proporcional a la concentración de la proteína presente en la muestra y permite evaluar la expresión de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de dos placas de YES total

El protocolo de dos placas consiste en cultivar las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y, posteriormente, transferir los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección HTRF Total YES. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa de YES total

La detección de YES total con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Compatible con automatización: Sí
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis 4
Modificación molecular total
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Objetivo-SÍ
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: humanos
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica - Oncología de la inflamación
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo