Revvity, 6760605R, Kit de detección de FITC AlphaScreen, 50 000 puntos de ensayo

Descripción general
Este kit contiene suficientes reactivos para ejecutar 50.000 pocillos en formato de 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 25 µL.
Este kit de cuentas se puede utilizar para muchas aplicaciones, entre ellas:

Ensayos de interacción proteína-proteína
Ensayos de interacción proteína-péptido
Ensayos de interacción ADN-proteína
Ensayos de interacción ARN-proteína
Detección y cuantificación de proteínas marcadas con FITC
Expresión de proteínas
Estudios de encuadernación

En un ensayo AlphaScreen típico, una biomolécula de interés está biotinilada y se asocia con las microesferas donantes recubiertas de estreptavidina. La otra biomolécula está marcada con FITC y se asocia con las microesferas aceptoras anti-FITC de AlphaScreen. Si ambas biomoléculas se unen, las microesferas donantes y aceptoras se aproximan. La excitación de las microesferas donantes provoca la liberación de oxígeno singlete, que se difunde y desencadena la emisión de luz de las microesferas aceptoras al estar cerca. La cantidad de luz es directamente proporcional al grado de interacción. También se pueden utilizar formatos de competición utilizando la sonda FITC biotinilada incluida en el kit.
AlphaScreen® y AlphaLISA™ son tecnologías de ensayo basadas en microesferas que se utilizan para estudiar interacciones biomoleculares en formato de microplaca. El acrónimo "Alpha" significa ensayo homogéneo de proximidad luminiscente amplificado. Como su nombre indica, una de las características clave de estas tecnologías es que son ensayos de proximidad homogéneos y no radiactivos. La unión de las moléculas capturadas en las microesferas provoca una transferencia de energía de una microesfera a otra, produciendo una señal luminiscente/fluorescente. Para comprender cómo se produce una señal, es necesario comenzar por comprender las microesferas. Los ensayos AlphaScreen y AlphaLISA requieren dos tipos de microesferas: microesferas donantes y microesferas aceptoras. Cada tipo de microesfera contiene una mezcla química patentada diferente, que son elementos clave de la tecnología AlphaScreen. Las microesferas donantes contienen un fotosensibilizador, la ftalocianina, que convierte el oxígeno ambiental en una forma excitada y reactiva de O₂, el oxígeno singlete, tras la iluminación a 680 nm. Tenga en cuenta que el oxígeno singlete no es un radical; Es oxígeno molecular con un solo electrón excitado. Al igual que otras moléculas excitadas, el oxígeno singlete tiene una vida útil limitada antes de volver a su estado fundamental. Dentro de su vida media de 4 µs, el oxígeno singlete puede difundirse aproximadamente a 200 nm en solución. Si una perla aceptora se encuentra cerca, la energía se transfiere del oxígeno singlete a los derivados de tioxeno dentro de la perla aceptora, lo que posteriormente culmina en la producción de luz a 520-620 nm (AlphaScreen) o a 615 nm (AlphaLISA). En ausencia de una perla aceptora, el oxígeno singlete vuelve a su estado fundamental y no se produce señal. Esta transferencia de energía química dependiente de la proximidad es la base de la naturaleza homogénea de AlphaScreen.
Interacción proteína-proteína-aplicación
Compatible con automatización: Sí
Marca-AlphaScreen
Conjugados-Estreptavidina/Anti-FITC
Modalidad de detección alfa
Especie huésped: humana
Kit de grupo de productos
Condiciones de envío - Envío en Blue Ice
Ensayo de unión de clase objetivo
Tecnología-Alfa
Tamaño de la unidad: 50.000 puntos de ensayo