Revvity, 81FL1EU1AB, pHSense Eu Anti-FLAG, 2 x 96 pocillos

Descripción general
pHSense™ Eu Anti-FLAG no permea las células y está marcado con un complejo de europio sensible al pH. Este anticuerpo monoclonal anti-FLAG está diseñado para monitorizar la internalización de receptores y proteínas de membrana cuando se marca con la secuencia FLAG® (DYKDDDDK) en la parte extracelular. El anticuerpo reconoce la secuencia FLAG® fusionada en el extremo N-terminal, intra o C-terminal y mantiene una fluorescencia mínima a pH extracelular neutro (≥7). Una vez internalizado, pHSense™ Eu Anti-FLAG encuentra compartimentos cada vez más ácidos, como los endosomas tempranos y tardíos y los lisosomas, donde la señal de europio se intensifica progresivamente. Este nuevo anti-FLAG de europio sensible al pH es compatible con la detección de fluorescencia resuelta en el tiempo (TRF), eliminando eficazmente la mayor parte del fondo de fluorescencia y mejorando significativamente la relación señal-fondo. Sus propiedades fotofísicas únicas permiten una detección sencilla y robusta sin lavado de la endocitosis mediada por receptores en ensayos basados ​​en placas con células vivas.
Cómo funciona
Principio del ensayo pHSense Eu-Anti-FLAG
pHSense Eu Anti-FLAG no permea las células y está marcado con un complejo de europio sensible al pH. Este anticuerpo monoclonal anti-FLAG está diseñado para monitorizar la internalización de receptores y proteínas de membrana al ser marcado con la secuencia FLAG®. El anticuerpo reconoce la secuencia FLAG y presenta una fluorescencia mínima a pH extracelular neutro (≥7). Una vez internalizado, pHSense Eu Anti-FLAG se encuentra con compartimentos cada vez más ácidos, como los endosomas tempranos y tardíos y los lisosomas, donde la señal fluorescente del europio se intensifica progresivamente.

Protocolo de ensayo pHSense Eu Anti-FLAG
El ensayo comienza cultivando células en una placa de 96 pocillos. A continuación, se añade pHSense Eu Anti-FLAG a las células y se incuba durante 1 hora a temperatura ambiente. Tras esta incubación, las células se estimulan con un compuesto farmacológico. La fluorescencia se mide cinéticamente o al final del ensayo utilizando un lector de placas compatible con HTRF. Aplicación: Internalización.
Marca-pHSense
Modalidad de detección: colorante sensible al pH
Grupo de productos: reactivo fluorescente
Volumen de muestra: 50 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Bandera de objetivo
Clase objetivo: proteínas de superficie celular, anticuerpos, ADC
Tecnología-TRF
Tamaño de la unidad: 2 x 96 pocillos