Revvity, 81HAEU1AC, pHSense Eu Anti-HA, 10 x 96 pocillos

Descripción general
pHSense Eu Anti-HA no permea las células y está marcado con un complejo de europio sensible al pH. Está diseñado específicamente para monitorizar la internalización de receptores y proteínas de membrana marcados con un epítopo de HA en su dominio extracelular. Este anticuerpo monoclonal de ratón anti-HA (IgG2b) está marcado con pHSense y se activa contra la secuencia peptídica de doce aminoácidos CYPYDVPDYASL. Reconoce el epítopo de la hemaglutinina del virus de la influenza (YPYDVPDYA), que se ha utilizado ampliamente como etiqueta de epítopo general en vectores de expresión. A pH extracelular neutro (≥7), su fluorescencia permanece mínima. Una vez internalizado, pHSense Eu Anti-HA encuentra compartimentos cada vez más ácidos, como los endosomas tempranos y tardíos y los lisosomas, donde la señal de europio se intensifica progresivamente. Este nuevo anti-HA de europio sensible al pH es compatible con la detección de fluorescencia resuelta en el tiempo (TRF), eliminando eficazmente la mayor parte del fondo de fluorescencia y mejorando significativamente la relación señal-fondo. Sus propiedades fotofísicas únicas permiten una detección sencilla y robusta sin lavado de la endocitosis mediada por receptores en ensayos en placa con células vivas.
Cómo funciona
Principio del ensayo pHSense Eu-Anti-HA
pHSense Eu Anti-HA no permea las células y está marcado con un complejo de europio sensible al pH. Este anticuerpo monoclonal anti-HA está diseñado para monitorizar la internalización de receptores y proteínas de membrana cuando se marca con un epítopo de HA. El anticuerpo reconoce la secuencia de HA y presenta una mínima fluorescencia a pH extracelular neutro (≥7). Una vez internalizado, pHSense Eu Anti-HA se encuentra con compartimentos cada vez más ácidos, como los endosomas tempranos y tardíos y los lisosomas, donde la señal fluorescente del europio se intensifica progresivamente.

Protocolo de ensayo pHSense Eu Anti-HA
El ensayo comienza con el cultivo celular en una placa de 96 pocillos. A continuación, se añade pHSense Eu Anti-HA a las células y se incuba durante 1 hora a temperatura ambiente. Tras esta incubación, se estimulan las células con un compuesto farmacológico. La fluorescencia se mide cinéticamente o al final del ensayo utilizando un lector de placas compatible con TRF. Aplicación: Internalización.
Marca-pHSense
Modalidad de detección: colorante sensible al pH
Grupo de productos: reactivo fluorescente
Volumen de muestra: 50 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Objetivo-HA
Clase objetivo: proteínas de superficie celular, anticuerpos, ADC
Tecnología-TRF
Tamaño de la unidad: 10 x 96 pocillos