Revvity, 81SNEU1AB, reactivo de etiquetado pHSense Eu SNAP, 2 x 96 pocillos

Descripción general
El reactivo de marcado pHSense™ Eu SNAP no permea las células y está marcado con un complejo de europio sensible al pH que interactúa de forma específica y covalente con los receptores SNAP-tag® y las proteínas de membrana para monitorizar su internalización. Las células que expresan receptores y proteínas de membrana marcados con una etiqueta SNAP en la parte extracelular pueden marcarse con el reactivo de marcado pHSense™ Eu SNAP y mantienen una fluorescencia mínima a pH extracelular neutro (≥7). Una vez internalizado, el reactivo de marcado pHSense™ Eu SNAP entra en contacto con compartimentos cada vez más ácidos, como los endosomas tempranos y tardíos y los lisosomas, donde la señal de europio se intensifica progresivamente. Este nuevo reactivo de marcado SNAP de europio sensible al pH es compatible con la detección de fluorescencia resuelta en el tiempo (TRF), eliminando eficazmente la mayor parte del fondo de fluorescencia y mejorando significativamente la relación señal-fondo. Sus propiedades fotofísicas únicas permiten una detección sencilla y robusta sin lavado de la endocitosis mediada por receptores en ensayos basados ​​en placas con células vivas.
Cómo funciona
Principio del ensayo del reactivo de etiquetado pHSense Eu SNAP
El reactivo de marcado pHSense Eu SNAP no permea las células y está marcado con un complejo de europio sensible al pH que interactúa de forma específica y covalente con los receptores SNAP-tag® y las proteínas de membrana, diseñados para monitorizar su internalización. Las células que expresan receptores y proteínas de membrana marcados con una etiqueta SNAP en la parte extracelular pueden marcarse con el reactivo de marcado pHSense Eu SNAP y mantienen una fluorescencia mínima a pH extracelular neutro (≥7). Una vez internalizado, el reactivo de marcado pHSense Eu SNAP entra en contacto con compartimentos cada vez más ácidos, como los endosomas tempranos y tardíos y los lisosomas, donde la señal fluorescente del europio se intensifica progresivamente.

Protocolo de ensayo del reactivo de etiquetado pHSense Eu SNAP
El ensayo comienza cultivando células en una placa de 96 pocillos. A continuación, se añade el reactivo de marcaje pHSense SNAP a las células y se incuban durante 1 hora a temperatura ambiente. Tras esta incubación, se estimulan las células con un compuesto farmacológico. La fluorescencia se mide cinéticamente o al final del ensayo utilizando un lector de placas compatible con HTRF. Aplicación: Internalización.
Marca-pHSense
Modalidad de detección: colorante sensible al pH
Grupo de productos: reactivo fluorescente
Volumen de muestra: 50 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Proteína de fusión Target-SNAP-tag
Clase objetivo: proteínas de superficie celular, anticuerpos, ADC
Tecnología-TRF
Tamaño de la unidad: 2 x 96 pocillos