Product Description
Descripción general
Un ensayo AlphaLISA con estas microesferas aceptoras permite la detección de IgG4 humana en tampón, medios de cultivo celular, suero y plasma de forma altamente sensible, cuantitativa, reproducible y fácil de usar. Estas microesferas (junto con una microesfera donante adecuada) permiten realizar estudios de unión de anticuerpos o la detección de IgG4 humana en diferentes matrices de muestra, incluido el suero de mono.
En un ensayo AlphaLISA típico, 1 mg de perlas aceptoras es suficiente para ejecutar entre 1000 y 2000 pocillos utilizando un volumen de reacción de 50 µL.
Características:
Pasos sin lavado, sin pasos de separación
Facilidad de uso: pocos pasos adicionales, desarrollo rápido del ensayo
Amplia gama de afinidades: detecta interacciones fuertes o débiles, desde afinidad pM hasta mM
Distancia: mide complejos de proteínas o anticuerpos muy grandes, que abarcan hasta 200 nm o más
Alta avidez: los múltiples sitios de unión en cada perla permiten el uso de concentraciones nanomolares de anticuerpos o proteínas, así como el uso de aglutinantes de baja afinidad.
La inmunoglobulina G (IgG), una importante molécula efectora de la respuesta inmunitaria humoral, representa aproximadamente el 75% del total de inmunoglobulinas en el plasma de individuos sanos, mientras que las IgM, IgA, IgD e IgE, cada una con propiedades y funciones características, constituyen el 25% restante. La molécula básica de IgG tiene una estructura de cuatro cadenas, compuesta por dos cadenas pesadas (H) idénticas y dos cadenas ligeras (L) idénticas, unidas entre sí por enlaces disulfuro intercatenarios. Se han identificado cuatro subclases de IgG: IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4. Los anticuerpos bioterapéuticos, generalmente moléculas IgG1 o IgG4, son cada vez más importantes para tratar enfermedades debilitantes como el cáncer y los trastornos autoinmunes. Es necesario medir con precisión los niveles de los fármacos en diversas etapas del desarrollo farmacológico, incluyendo el descubrimiento temprano de anticuerpos, la investigación preclínica en animales y la fabricación comercial.
AlphaScreen® y AlphaLISA™ son tecnologías de ensayo basadas en microesferas que se utilizan para estudiar interacciones biomoleculares en formato de microplaca. El acrónimo "Alpha" significa ensayo homogéneo de proximidad luminiscente amplificado. Como su nombre indica, una de las características clave de estas tecnologías es que son ensayos de proximidad homogéneos y no radiactivos. La unión de las moléculas capturadas en las microesferas provoca una transferencia de energía de una a otra, produciendo una señal luminiscente/fluorescente. Para comprender cómo se produce una señal, es necesario comenzar por comprender las microesferas. Los ensayos AlphaScreen y AlphaLISA requieren dos tipos de microesferas: las microesferas donantes y las microesferas aceptoras. Cada tipo de microesfera contiene una mezcla química patentada diferente, que son elementos clave de la tecnología AlphaScreen. Las microesferas donantes contienen un fotosensibilizador, la ftalocianina, que convierte el oxígeno ambiental en una forma excitada y reactiva de O₂, oxígeno singlete, al iluminarse a 680 nm. Tenga en cuenta que el oxígeno singlete no es un radical, sino oxígeno molecular con un solo electrón excitado. Al igual que otras moléculas excitadas, el oxígeno singlete tiene una vida media limitada antes de volver a su estado fundamental. Dentro de su vida media de 4 µs, el oxígeno singlete puede difundirse aproximadamente a 200 nm en solución. Si una perla aceptora se encuentra cerca, la energía se transfiere del oxígeno singlete a los derivados de tioxeno dentro de la perla aceptora, lo que posteriormente culmina en la producción de luz a 520-620 nm (AlphaScreen) o a 615 nm (AlphaLISA). En ausencia de una perla aceptora, el oxígeno singlete vuelve a su estado fundamental y no se produce señal. Esta transferencia de energía química dependiente de la proximidad es la base de la naturaleza homogénea de AlphaScreen. Interacción entre aplicaciones y proteínas.
Compatible con automatización: Sí
Tipo de perla o material: aceptor AlphaLISA
Marca AlphaLISA
Conjugados anti-IgG4 humana
Modalidad de detección alfa
Especie huésped: humana
Grupo de productos: Perlas
Condiciones de envío - Envío en Blue Ice
Clase objetivo: productos biológicos
Especie objetivo: humanos
Tecnología-Alfa
Tamaño de la unidad: 25 mg
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