Revvity, AL201C, kit de detección de VEGF humano AlphaLISA, 500 puntos de ensayo

Descripción general
Los anticuerpos de este kit reconocen VEGF-A (VEGF165 o isoforma d), VEGF162, VEGF145 (isoforma e) y VEGF121 (isoforma f). Uno de los anticuerpos sándwich es un monoclonal de ratón, clon 26503. El otro anticuerpo sándwich es un policlonal de cabra desarrollado contra VEGF165 recombinante humano.
Formatos:

Nuestro kit de 500 puntos de ensayo le permite ejecutar 500 pocillos en formato de 96 pocillos o 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 50 µL (5 µL de muestra).
Nuestro kit de 5000 puntos de ensayo le permite ejecutar 5000 pocillos en formato de 96 o 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 50 µL (5 µL de muestra).

Características:

Pasos sin lavado, sin pasos de separación
Tecnología alternativa ELISA
Detección sensible
Amplia compatibilidad de muestras
Pequeño volumen de muestra
Resultados en menos de 3 horas
La mitad del tiempo de un ensayo ELISA

El factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF-A o VEGF) es una glicoproteína homodímera de 34-42 kDa que se une a la heparina y es específica de las células endoteliales. Actualmente, se han identificado al menos ocho variantes de VEGF generadas por corte y empalme alternativo del mismo gen. Las diversas isoformas presentan diferentes propiedades de unión a la heparina y la neuropilina (-1 o -2), así como características de solubilidad que reflejan las diferentes propiedades funcionales de las formas de VEGF. Se cree que el VEGF desempeña un papel importante en la inflamación y durante la angiogénesis normal y patológica, un proceso asociado con la cicatrización de heridas, el desarrollo embrionario y el crecimiento y la metástasis de tumores sólidos. Se han observado niveles elevados de VEGF en el líquido sinovial de pacientes con artritis reumatoide y en el suero de pacientes con cáncer.
La tecnología AlphaLISA permite la detección de moléculas de interés en un ensayo cuantitativo sin lavado y de alta sensibilidad. En un ensayo AlphaLISA, un anticuerpo antianalito biotinilado se une a las microesferas donantes recubiertas de estreptavidina, mientras que otro anticuerpo antianalito se conjuga con las microesferas aceptoras AlphaLISA. En presencia del analito, las microesferas se aproximan. La excitación de las microesferas donantes provoca la liberación de moléculas de oxígeno singlete, lo que desencadena una cascada de transferencia de energía en las microesferas aceptoras, lo que resulta en un pico nítido de emisión de luz a 615 nm.
Cómo funciona
Principio del ensayo AlphaLISA
El ensayo AlphaLISA se basa en un inmunoensayo tipo sándwich AlphaLISA que utiliza un anticuerpo antianalito biotinilado unido a microesferas donantes AlphaLISA recubiertas de estreptavidina y un anticuerpo antianalito conjugado a microesferas aceptoras AlphaLISA. Ambos anticuerpos se dirigen contra el analito de interés. En presencia de la diana, ambos anticuerpos se unen al analito y las microesferas se aproximan. La excitación de las microesferas donantes provoca la liberación de moléculas de oxígeno singlete, lo que desencadena una cascada de transferencia de energía dentro de las microesferas aceptoras, lo que resulta en una emisión con λmax a 615 nm. La intensidad de la señal es directamente proporcional a la concentración de analito presente en la muestra.

Protocolo del ensayo AlphaLISA
El ensayo AlphaLISA puede ejecutarse en una placa de detección de 96 o 384 pocillos (50 µL final). Como se describe aquí, las muestras o los estándares se dispensan directamente en la placa de ensayo para la detección del analito de interés mediante los reactivos AlphaLISA. No se requieren lavados. El protocolo puede miniaturizarse o ampliarse aún más simplemente ajustando proporcionalmente el tamaño de cada volumen añadido.
Aplicación: Cuantificación de proteínas
Compatible con automatización: Sí
Marca AlphaLISA
Modalidad de detección alfa
Rango dinámico: 2,2 - 100 000 pg/ml
Límite de detección: 2,2 pg/mL
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 5 µL
Condiciones de envío - Envío en Blue Ice
Objetivo-VEGF-A
Biomarcadores de clase objetivo
Especie objetivo: humanos
Tecnología-Alfa
Área Terapéutica-Oncología
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo