Revvity, AL203F, AlphaLISA Kit de detección de amiloide-β 1-42 humano, 5000 puntos de ensayo

Descripción general
Un anticuerpo es específico para los aminoácidos 17-24 (epítopo VFFAE): anticuerpo monoclonal de ratón, clon número 4G8. El segundo anticuerpo es específico para el extremo C-terminal: anticuerpo monoclonal de ratón, clon número 12F4.
Formatos:

Nuestro kit de 500 puntos de ensayo le permite ejecutar 500 pocillos en formato de 96 pocillos o 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 50 µL (5 µL de muestra).
Nuestro kit de 5000 puntos de ensayo le permite ejecutar 5000 pocillos en formato de 96 o 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 50 µL (5 µL de muestra).

Características:

Pasos sin lavado, sin pasos de separación
Tecnología alternativa ELISA
Detección sensible
Amplia compatibilidad de muestras
Pequeño volumen de muestra
Resultados en menos de 3 horas
La mitad del tiempo de un ensayo ELISA

El beta amiloide (Aß) es un péptido corto derivado de la proteólisis de una molécula transmembrana más grande, la proteína precursora amiloide (APP). Las ß- y γ-secretasas escinden los extremos N- y C-terminales de la secuencia Aß, liberando el péptido Aβ de la APP. El Aß40 es la principal especie de Aß producida por neuronas y otras células, y representa más del 70% del total de Aß producido, mientras que el 10-20% restante se compone del Aß42, de mayor longitud, y otras especies. El Aß42 presenta mayor propensión a formar agregados o fibrillas y también presenta mayor toxicidad neuronal en modelos de cultivo tisular que el Aß40, lo que implica que el Aß42 es un factor más importante en la patogénesis y la formación de placas de la enfermedad de Alzheimer (EA). Los niveles de Aß42 en el líquido cefalorraquídeo están disminuidos en la mayoría de los sujetos con EA (probablemente debido a su agregación en placas), lo que lo convierte en un biomarcador importante para esta enfermedad.
La tecnología AlphaLISA permite la detección de moléculas de interés en un ensayo cuantitativo sin lavado y de alta sensibilidad. En un ensayo AlphaLISA, un anticuerpo antianalito biotinilado se une a las microesferas donantes recubiertas de estreptavidina, mientras que otro anticuerpo antianalito se conjuga con las microesferas aceptoras AlphaLISA. En presencia del analito, las microesferas se aproximan. La excitación de las microesferas donantes provoca la liberación de moléculas de oxígeno singlete, lo que desencadena una cascada de transferencia de energía en las microesferas aceptoras, lo que resulta en un pico nítido de emisión de luz a 615 nm.
Cómo funciona
Principio del ensayo AlphaLISA

El ensayo AlphaLISA se basa en un inmunoensayo tipo sándwich AlphaLISA que utiliza un anticuerpo antianalito biotinilado unido a microesferas donantes AlphaLISA recubiertas de estreptavidina y un anticuerpo antianalito conjugado a microesferas aceptoras AlphaLISA. Ambos anticuerpos se dirigen contra el analito de interés. En presencia de la diana, ambos anticuerpos se unen al analito y las microesferas se aproximan. La excitación de las microesferas donantes provoca la liberación de moléculas de oxígeno singlete, lo que desencadena una cascada de transferencia de energía dentro de las microesferas aceptoras, lo que resulta en una emisión con λmax a 615 nm. La intensidad de la señal es directamente proporcional a la concentración de analito presente en la muestra.

Protocolo del ensayo AlphaLISA

El ensayo AlphaLISA puede ejecutarse en una placa de detección de 96 o 384 pocillos (50 µL final). Como se describe aquí, las muestras o los estándares se dispensan directamente en la placa de ensayo para la detección del analito de interés mediante los reactivos AlphaLISA. No se requieren lavados. El protocolo puede miniaturizarse o ampliarse aún más simplemente ajustando proporcionalmente el tamaño de cada volumen añadido.
Aplicación: Cuantificación de proteínas
Compatible con automatización: Sí
Marca AlphaLISA
Modalidad de detección alfa
Rango dinámico: 300 - 300.000 pg/mL
Especie huésped: humana
Límite de detección: 300 pg/mL
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 5 µL
Condiciones de envío - Envío en Blue Ice
Objetivo-Aβ42
Biomarcadores de clase objetivo
Especie objetivo: humanos
Tecnología-Alfa
Área terapéutica - Sistema nervioso central
Tamaño de la unidad: 5000 puntos de ensayo