Revvity, AL270C, kit de detección de PCSK9 humana AlphaLISA, 500 puntos de ensayo

Descripción general
Formatos:

Nuestro kit de 500 puntos de ensayo le permite ejecutar 500 pocillos en formato de 96 pocillos o 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 50 µL (5 µL de muestra).
Nuestro kit de 5000 puntos de ensayo le permite ejecutar 5000 pocillos en formato de 96 o 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 50 µL (5 µL de muestra).

Características:

Pasos sin lavado, pasos sin separación
Tecnología alternativa ELISA
Detección sensible
Amplia compatibilidad de muestras
Pequeño volumen de muestra
Resultados en menos de 3 horas
La mitad del tiempo de un ensayo ELISA

La proproteína convertasa subtilisina/kexina tipo 9 (PCSK9) humana pertenece a la subfamilia de las proteinasas K de la familia de las subtilasas secretoras. Esta glicoproteína contiene 692 aminoácidos, incluyendo un péptido señal, un prodominio y un dominio catalítico. Inicialmente sintetizada como una proteína precursora soluble de 74 kDa, se escinde en dominios de 14 kDa y 60 kDa, que permanecen asociados. Esta proteína desempeña un papel regulador importante en la homeostasis del colesterol y se expresa ampliamente en el riñón, el hígado y el intestino. La PCSK9 se une al receptor de lipoproteínas de baja densidad (LDLR), induciendo su degradación. La reducción de los niveles de LDLR resulta en una disminución del metabolismo de las lipoproteínas de baja densidad, lo que podría conducir a hipercolesterolemia. Actualmente se está explorando la inhibición de la función de la PCSK9 como un medio para reducir los niveles de colesterol. Las mutaciones en este gen se han asociado con una forma rara de hipercolesterolemia familiar autosómica dominante.
La tecnología AlphaLISA permite la detección de moléculas de interés en un ensayo cuantitativo sin lavado y de alta sensibilidad. En un ensayo AlphaLISA, un anticuerpo antianalito biotinilado se une a las microesferas donantes recubiertas de estreptavidina, mientras que otro anticuerpo antianalito se conjuga con las microesferas aceptoras AlphaLISA. En presencia del analito, las microesferas se aproximan. La excitación de las microesferas donantes provoca la liberación de moléculas de oxígeno singlete, lo que desencadena una cascada de transferencia de energía en las microesferas aceptoras, lo que resulta en un pico nítido de emisión de luz a 615 nm.
Cómo funciona
Principio del ensayo AlphaLISA

El ensayo AlphaLISA se basa en un inmunoensayo tipo sándwich AlphaLISA que utiliza un anticuerpo antianalito biotinilado unido a microesferas donantes AlphaLISA recubiertas de estreptavidina y un anticuerpo antianalito conjugado a microesferas aceptoras AlphaLISA. Ambos anticuerpos se dirigen contra el analito de interés. En presencia de la diana, ambos anticuerpos se unen al analito y las microesferas se aproximan. La excitación de las microesferas donantes provoca la liberación de moléculas de oxígeno singlete, lo que desencadena una cascada de transferencia de energía dentro de las microesferas aceptoras, lo que resulta en una emisión con λmax a 615 nm. La intensidad de la señal es directamente proporcional a la concentración de analito presente en la muestra.

Protocolo del ensayo AlphaLISA

El ensayo AlphaLISA puede ejecutarse en una placa de detección de 96 o 384 pocillos (50 µL final). Como se describe aquí, las muestras o los estándares se dispensan directamente en la placa de ensayo para la detección del analito de interés mediante los reactivos AlphaLISA. No se requieren lavados. El protocolo puede miniaturizarse o ampliarse aún más simplemente ajustando proporcionalmente el tamaño de cada volumen añadido.
Aplicación: Cuantificación de proteínas
Compatible con automatización: Sí
Marca AlphaLISA
Modalidad de detección alfa
Rango dinámico: 1.056 - 300.000 pg/ml
Límite de detección: 1056 pg/mL
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 5 µL
Condiciones de envío - Envío en Blue Ice
Objetivo-PCSK9
Biomarcadores de clase objetivo
Especie objetivo: humanos
Tecnología-Alfa
Área terapéutica-Cardiovascular
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo