Revvity, AL3095C, kit de unión de FcRn humano AlphaLISA, 500 puntos de ensayo

Descripción general
Este kit está diseñado para la detección de la unión entre el FcRn (receptor Fc neonatal) y la IgG humana mediante un ensayo AlphaLISA homogéneo (sin lavado). Este ensayo facilita el diseño y desarrollo de terapias con anticuerpos mediante un formato de ensayo de competición.
Características de AlphaLISA:

Pasos sin lavado, sin pasos de separación
Facilidad de uso: pocos pasos adicionales, desarrollo rápido del ensayo
Amplia gama de afinidades: detecta interacciones fuertes o débiles, desde afinidad pM hasta mM
Distancia: mide complejos de proteínas o anticuerpos muy grandes, que abarcan hasta 200 nm o más
Alta avidez: los múltiples sitios de unión en cada perla permiten el uso de concentraciones nanomolares de anticuerpos o proteínas, así como el uso de aglutinantes de baja afinidad.

El FcRn humano, también conocido como receptor Fc neonatal, es un heterodímero de FCGRT (fragmento Fc del receptor y transportador de IgG) y B2M (microglobulina beta 2). Entre varios receptores Fc que se sabe que interactúan con anticuerpos IgG, el FcRn desempeña un papel fundamental en el mantenimiento de la homeostasis de la IgG. Después de que la IgG se une a su diana en la superficie celular, se pinocitaria al endosoma, donde el FcRn se une a los anticuerpos a pH ácido (6,0) y recicla los anticuerpos de vuelta a la circulación a pH fisiológico (7,4). La dependencia del pH de la unión del FcRn proviene principalmente de los residuos de histidina His 310, His 435 y His 436 de la IgG, que se protonan a pH 6 creando una fuerte interacción con el bolsillo aniónico del FcRn; se neutralizan a pH 7,4 liberando la IgG del FcRn. Como resultado, los anticuerpos pueden protegerse de la degradación lisosomal, lo que mejora su estabilidad y eficacia in vivo. Por ello, las agencias reguladoras suelen exigir la determinación del perfil de unión de FcRn.
La detección de la unión de FcRn e IgG mediante AlphaLISA utiliza microesferas aceptoras AlphaLISA™ de IgG humana y microesferas donantes recubiertas de estreptavidina para capturar el receptor Fc humano biotinilado. Las microesferas donantes y aceptoras se aproximan mediante la unión del fragmento Fc de IgG al FcRn. La excitación de las microesferas donantes provoca la liberación de oxígeno singlete, lo que desencadena una cascada de reacciones de transferencia de energía en las microesferas aceptoras, lo que resulta en un pico nítido de emisión de luz a 615 nm.
Interacción proteína-proteína-aplicación
Compatible con automatización: Sí
Marca AlphaLISA
Modalidad de detección alfa
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 10 µL
Condiciones de envío - Envío en Blue Ice
Ensayo de unión de clase objetivo
Especie objetivo: humanos
Tecnología-Alfa
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo