Revvity, AL3117C, kit de detección de IRAK4 total humano AlphaLISA, 500 puntos de ensayo

Descripción general
Formatos:

Nuestro kit de 100 puntos de ensayo le permite ejecutar 100 pocillos en formato de 96 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 100 µL (10 µL de muestra).
Nuestro kit de 500 puntos de ensayo le permite ejecutar 500 pocillos en formato de 96 pocillos o 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 50 µL (5 µL de muestra).
Nuestro kit de 5000 puntos de ensayo le permite ejecutar 5000 pocillos en formato de 96 o 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 50 µL (5 µL de muestra).

Características de AlphaLISA:

Pasos sin lavado, sin pasos de separación
Tecnología alternativa ELISA
Detección sensible
Amplia compatibilidad de muestras
Pequeño volumen de muestra
Resultados en menos de 3 horas
La mitad del tiempo de un ensayo ELISA

La tecnología AlphaLISA permite la detección de moléculas de interés en tampones, medios de cultivo celular, suero y plasma de forma altamente sensible, cuantitativa, reproducible y fácil de usar. En un ensayo AlphaLISA, un anticuerpo antianalito biotinilado se une a las microesferas Alpha Donor recubiertas de estreptavidina, mientras que otro anticuerpo antianalito se conjuga con las microesferas AlphaLISA Acceptor. En presencia del analito, las microesferas se aproximan. La excitación de las microesferas Donor provoca la liberación de moléculas de oxígeno singlete, lo que desencadena una cascada de transferencia de energía en las microesferas Acceptor, lo que resulta en un pico nítido de emisión de luz a 615 nm.
IRAK4 (quinasa 4 asociada al receptor de interleucina 1 humana) es una proteína quinasa de serina/treonina que participa en la señalización de la respuesta inmunitaria innata. IRAK4 es reclutada por MD88 a través de la señalización TLR, donde fosforila IRAK1 y, en última instancia, provoca la translocación nuclear y la activación de NF-kappa-B. IRAK4 facilita la señalización de los receptores de células T. IRAK4 contiene estructuras de dominio similares a las de IRAK1, IRAK2, IRAKM y Pelle. IRAK4 se distingue de IRAK1, IRAK2 e IRAKM por su función secuencial anterior a las demás IRAK, pero se asemeja más a Pelle en este rasgo. Los animales deficientes en IRAK-4 son más susceptibles a virus y bacterias, pero completamente resistentes a la exposición a LPS.
Cómo funciona
Principio del ensayo AlphaLISA

El ensayo AlphaLISA se basa en un inmunoensayo tipo sándwich AlphaLISA que utiliza un anticuerpo antianalito biotinilado unido a microesferas donantes AlphaLISA recubiertas de estreptavidina y un anticuerpo antianalito conjugado a microesferas aceptoras AlphaLISA. Ambos anticuerpos se dirigen contra el analito de interés. En presencia de la diana, ambos anticuerpos se unen al analito y las microesferas se aproximan. La excitación de las microesferas donantes provoca la liberación de moléculas de oxígeno singlete, lo que desencadena una cascada de transferencia de energía dentro de las microesferas aceptoras, lo que resulta en una emisión con λmax a 615 nm. La intensidad de la señal es directamente proporcional a la concentración de analito presente en la muestra.

Protocolo del ensayo AlphaLISA

El ensayo AlphaLISA puede ejecutarse en una placa de detección de 96 o 384 pocillos (50 µL final). Como se describe aquí, las muestras o los estándares se dispensan directamente en la placa de ensayo para la detección del analito de interés mediante los reactivos AlphaLISA. No se requieren lavados. El protocolo puede miniaturizarse o ampliarse aún más simplemente ajustando proporcionalmente el tamaño de cada volumen añadido.
Aplicación: Cuantificación de proteínas
Compatible con automatización: Sí
Marca AlphaLISA
Modalidad de detección alfa
Rango dinámico: 15,6 - 1 000 000 pg/ml
Límite de detección: 15,6 pg/mL
Límite de cuantificación: 41,1 pg/mL
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 5 µL
Condiciones de envío - Envío en Blue Ice
Objetivo-IRAK4
Biomarcadores de clase objetivo
Especie objetivo: humanos
Tecnología-Alfa
Área terapéutica-Inflamación
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo