Revvity, AL3199HV, kit de detección de NFL humana AlphaLISA, 100 puntos de ensayo

Descripción general
La proteína de cadena ligera de neurofilamento, también conocida como polipéptido ligero de neurofilamento, NF-L, NFL o NEFL, pertenece a la familia de proteínas de filamento intermedio y se expresa selectivamente en neuronas. El NF-L (68 kDa), asociado con la cadena pesada de neurofilamento (NF-H, 200 kDa), la cadena media (NF-M, 125 kDa) y la alfa-internexina, forma la estructura de los axones. Dependiendo de las condiciones, se liberan diferentes niveles de NF-L durante el desarrollo cerebral, la maduración, el envejecimiento y en numerosas enfermedades neurodegenerativas, proporcionalmente al grado de daño axonal. Muchos estudios han demostrado que el NF-L puede utilizarse como biomarcador para el seguimiento de enfermedades y, de forma más amplia, como marcador de daño neuronal, pero también para comprobar la diferenciación neuronal en modelos IPSc, por ejemplo.
Formatos

Nuestro kit de 100 puntos de ensayo le permite ejecutar 100 pocillos en formato de 96 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 100 µL (10 µL de muestra).
Nuestro kit de 500 puntos de ensayo le permite ejecutar 500 pocillos en formato de 96 pocillos o 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 50 µL (5 µL de muestra).
Nuestro kit de 5000 puntos de ensayo le permite ejecutar 5000 pocillos en formato de 96 o 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 50 µL (5 µL de muestra).

Características

Pasos sin lavado, sin pasos de separación
Tecnología alternativa ELISA
Detección sensible
Amplia compatibilidad de muestras
Pequeño volumen de muestra
Resultados en menos de 3 horas

La tecnología AlphaLISA permite la detección de moléculas de interés en un ensayo cuantitativo sin lavado y de alta sensibilidad. En un ensayo AlphaLISA, un anticuerpo antianalito biotinilado se une a las microesferas donantes recubiertas de estreptavidina, mientras que otro anticuerpo antianalito se conjuga con las microesferas aceptoras AlphaLISA. En presencia del analito, las microesferas se aproximan. La excitación de las microesferas donantes provoca la liberación de moléculas de oxígeno singlete, lo que desencadena una cascada de transferencia de energía en las microesferas aceptoras, lo que resulta en un pico nítido de emisión de luz a 615 nm.
Cómo funciona
Principio del ensayo de cadena ligera de neurofilamentos humanos AlphaLISA
El ensayo AlphaLISA de cadena ligera de neurofilamento (NF-L) se basa en un inmunoensayo tipo sándwich AlphaLISA que utiliza un anticuerpo anti-hNF-L biotinilado unido a microesferas donantes AlphaLISA recubiertas de estreptavidina y un anticuerpo anti-NF-L conjugado a microesferas aceptoras AlphaLISA. Dos anticuerpos se dirigen contra la proteína hNF-L. En presencia de hNF-L, ambos anticuerpos se unen a hNF-L y las microesferas se aproximan. La excitación de las microesferas donantes provoca la liberación de moléculas de oxígeno singlete, lo que desencadena una cascada de transferencia de energía dentro de las microesferas aceptoras, lo que resulta en una emisión con λmax a 615 nm. La intensidad de la señal es directamente proporcional a la concentración de hNF-L presente en la muestra (sobrenadante celular).

Protocolo del ensayo de cadena ligera de neurofilamentos humanos AlphaLISA
El ensayo AlphaLISA de cadena ligera de neurofilamentos (NF-L) puede ejecutarse en una placa de detección de 96 o 384 pocillos (50 µL final). Como se describe aquí, las muestras (sobrenadantes celulares) o los estándares se dispensan directamente en la placa de ensayo para la detección de NF-L humano mediante reactivos AlphaLISA. No se requieren lavados. El protocolo puede miniaturizarse o ampliarse aún más simplemente ajustando proporcionalmente el volumen de cada adición.
Aplicación: Cuantificación de proteínas
Compatible con automatización: Sí
Marca AlphaLISA
Modalidad de detección alfa
Especie huésped: humana
Kit de grupo de productos
Condiciones de envío - Envío en Blue Ice
Neurofilamento objetivo L
Clase objetivo: citocinas
Especie objetivo: humanos
Tecnología-Alfa
Área terapéutica-Neurociencia
Tamaño de la unidad: 100 puntos de ensayo