Revvity, AL3205HV, AlphaLISA, kit de detección de HTT mutante en humanos y ratones, 100 puntos de ensayo

Descripción general
La huntingtina (HTT) es una proteína citoplasmática con una alta expresión en el cerebro, cuya función antiapoptótica es crucial para la supervivencia neuronal. La proteína silvestre (WT) presenta una estructura funcional, con un dominio de poliglutamina (poliQ) "normal" que contiene menos de 36Q. La proteína HTT mutante alberga un tracto poliQ anormalmente largo (> 36Q) que provoca la agregación de la proteína inoperante. La agregación de HTT provoca la muerte neuronal selectiva, responsable de la enfermedad de Huntington.
Formatos

Nuestro kit de 100 puntos de ensayo le permite ejecutar 100 pocillos en formato de 96 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 100 µL (10 µL de muestra).
Nuestro kit de 500 puntos de ensayo le permite ejecutar 500 pocillos en formato de 96 pocillos o 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 50 µL (5 µL de muestra).
Nuestro kit de 5000 puntos de ensayo le permite ejecutar 5000 pocillos en formato de 96 o 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 50 µL (5 µL de muestra).

Características

Pasos sin lavado, sin pasos de separación
Tecnología alternativa ELISA
Detección sensible
Amplia compatibilidad de muestras
Pequeño volumen de muestra
Resultados en menos de 4 horas

La tecnología AlphaLISA permite la detección de moléculas de interés en un ensayo cuantitativo sin lavado y de alta sensibilidad. En un ensayo AlphaLISA, un anticuerpo antianalito biotinilado se une a las microesferas donantes recubiertas de estreptavidina, mientras que otro anticuerpo antianalito se conjuga con las microesferas aceptoras AlphaLISA. En presencia del analito, las microesferas se aproximan. La excitación de las microesferas donantes provoca la liberación de moléculas de oxígeno singlete, lo que desencadena una cascada de transferencia de energía en las microesferas aceptoras, lo que resulta en un pico nítido de emisión de luz a 615 nm.
Cómo funciona
Principio del ensayo AlphaLISA Human & Mouse Mutant HTT
El ensayo AlphaLISA Mutant HTT se basa en un inmunoensayo sándwich AlphaLISA que utiliza un anticuerpo antidiana biotinilado unido a microesferas donantes AlphaLISA recubiertas de estreptavidina y un anticuerpo antidiana conjugado a microesferas aceptoras AlphaLISA. Un anticuerpo se dirige contra la proteína HTT total, mientras que el segundo reconoce específicamente el dominio poliQ mutante. En presencia de la diana, ambos anticuerpos se unen a la HTT mutante y las microesferas se aproximan. La excitación de las microesferas donantes provoca la liberación de moléculas de oxígeno singlete, lo que desencadena una cascada de transferencia de energía dentro de las microesferas aceptoras, lo que resulta en una emisión con λmax a 615 nm. La intensidad de la señal es directamente proporcional a la concentración de HTT mutante presente en la muestra (lisado celular o tisular).

Protocolo del ensayo AlphaLISA de HTT mutante en humanos y ratones
El ensayo AlphaLISA Mutant HTT puede ejecutarse en una placa de detección de 96 o 384 pocillos (50 µL final). Como se describe aquí, las muestras (lisados ​​celulares o tisulares) o el lisado de control se dispensan directamente en la placa de ensayo para la detección de HTT mutante mediante reactivos AlphaLISA. No se requieren lavados. El protocolo puede miniaturizarse o ampliarse aún más simplemente ajustando proporcionalmente el volumen de cada adición.
Aplicación: Cuantificación de proteínas
Compatible con automatización: Sí
Marca AlphaLISA
Modalidad de detección alfa
Kit de grupo de productos
Tiempo de protocolo: 3,5 h a temperatura ambiente
Volumen de muestra: 10 µL
Condiciones de envío - Envío en Blue Ice
Objetivo-HTT
Biomarcadores de clase objetivo
Especie objetivo: ratón humano
Tecnología-Alfa
Área terapéutica-Neurociencia
Tamaño de la unidad: 100 puntos de ensayo