Revvity, AL3208C, kit de detección de PICP humano AlphaLISA (propéptido C-terminal de procolágeno 1), 500 puntos de ensayo

Descripción general
El colágeno tipo 1 es una proteína presente en abundancia en la matriz extracelular, donde forma fibrillas de reticulación que se asocian en fibras de colágeno más grandes para desempeñar un papel de soporte estructural en tejidos conectivos como cartílago, hueso, tendón y piel. Debido a su naturaleza muy insoluble en su forma madura, el colágeno se expresa y transporta como un procolágeno, en el que la secuencia de colágeno maduro está flanqueada por dos propéptidos designados respectivamente como PINP (Pro-colágeno tipo 1 N-terminal Propeptide) y PICP (Pro-colágeno tipo 1 C-terminal Propeptide). La detección y cuantificación del colágeno maduro no es posible en inmunoensayos debido a su insoluble y pegajosidad. En cambio, la detección de la forma completa del procolágeno o uno de los propéptidos es un buen indicador para cuantificar la expresión de colágeno en las células. En particular, la selección de un propéptido como el PICP permite cuantificar tanto el procolágeno expresado, pero aún no procesado, en colágeno maduro, como el PICP libre, escindido de la secuencia madura, que es un marcador del colágeno depositado en la matriz extracelular. El presente kit está diseñado para la detección cuantitativa del PICP humano (propéptido C-terminal del procolágeno 1) en sobrenadantes.
Formatos

Nuestro kit de 100 puntos de ensayo le permite ejecutar 100 pocillos en formato de 96 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 100 µL (10 µL de muestra).
Nuestro kit de 500 puntos de ensayo le permite ejecutar 500 pocillos en formato de 96 pocillos o 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 50 µL (5 µL de muestra).
Nuestro kit de 5000 puntos de ensayo le permite ejecutar 5000 pocillos en formato de 96 o 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 50 µL (5 µL de muestra).

Características

Pasos sin lavado, pasos sin separación
Tecnología alternativa ELISA
Amplia compatibilidad de muestras
Pequeño volumen de muestra
Resultados en menos de 3 horas

La tecnología AlphaLISA permite la detección de moléculas de interés en un ensayo cuantitativo sin lavado y de alta sensibilidad. En un ensayo AlphaLISA, un anticuerpo antianalito biotinilado se une a las microesferas donantes recubiertas de estreptavidina, mientras que otro anticuerpo antianalito se conjuga con las microesferas aceptoras AlphaLISA. En presencia del analito, las microesferas se aproximan. La excitación de las microesferas donantes provoca la liberación de moléculas de oxígeno singlete, lo que desencadena una cascada de transferencia de energía en las microesferas aceptoras, lo que resulta en un pico nítido de emisión de luz a 615 nm.
Cómo funciona
Principio del ensayo PICP humano AlphaLISA
El ensayo AlphaLISA Human PICP se basa en un inmunoensayo AlphaLISA tipo sándwich que utiliza un anticuerpo anti-PICP humano biotinilado (hPICP) unido a microesferas donantes AlphaLISA recubiertas de estreptavidina y un anticuerpo anti-hPICP conjugado a microesferas aceptoras AlphaLISA. Dos anticuerpos se dirigen contra la proteína hPICP. En presencia de hPICP, ambos anticuerpos se unen a la PICP humana y las microesferas se aproximan. La excitación de las microesferas donantes provoca la liberación de moléculas de oxígeno singlete que desencadenan una cascada de transferencia de energía dentro de las microesferas aceptoras, lo que resulta en una emisión con λmax a 615 nm. La intensidad de la señal es directamente proporcional a la concentración de hPICP presente en la muestra (proteína recombinante o sobrenadante celular).

Protocolo del ensayo PICP humano AlphaLISA
El ensayo AlphaLISA Human PICP puede ejecutarse en una placa de detección de 96 o 384 pocillos (50 µL final). Como se describe aquí, las muestras (sobrenadantes celulares) o los estándares se dispensan directamente en la placa de ensayo para la detección de PICP humano mediante reactivos AlphaLISA. No se requieren lavados. El protocolo puede miniaturizarse o ampliarse aún más simplemente ajustando proporcionalmente el tamaño de cada volumen añadido.
Aplicación: Cuantificación de proteínas
Compatible con automatización: Sí
Marca AlphaLISA
Modalidad de detección alfa
Rango dinámico-21 - 100.000 pg/mL
Límite de detección: 21 pg/mL
Límite de cuantificación: 66 pg/mL
Kit de grupo de productos
Tiempo de protocolo: 1h30 a RT
Volumen de muestra: 5 µL
Condiciones de envío - Envío en Blue Ice
Objetivo-PICP
Biomarcador de clase objetivo
Especie objetivo: humanos
Tecnología-Alfa
Área Terapéutica-Oncología
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo