Revvity, AL3209C, AlphaLISA, kit de detección de α-SMA humana y de ratón, 500 puntos de ensayo

Descripción general
La actina de músculo liso alfa o α-SMA es un miembro de la familia de las actinas que forma microfilamentos y se utiliza como marcador de la formación de miofibroblastos. Tras una lesión tisular, el TGF-β liberado localmente por las células inflamatorias activa los fibroblastos residentes o las células madre hepáticas (células estrelladas hepáticas) quiescentes. Esto conduce a su diferenciación en miofibroblastos, cuya función es migrar al tejido dañado y sintetizar componentes de la matriz extracelular (MEC) para reparar la herida. Los miofibroblastos se caracterizan por la expresión de novo de alfa-SMA, que se incorpora a las fibras de estrés de actina y confiere a las células una alta actividad contráctil. La lesión tisular crónica provoca la formación persistente de novo de miofibroblastos (alfa-SMA+), una contracción excesiva y el depósito de MEC, lo que finalmente conduce a la fibrosis tisular.
Formatos:

Nuestro kit de 100 puntos de ensayo le permite ejecutar 100 pocillos en formato de 96 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 100 µL (10 µL de muestra).
Nuestro kit de 500 puntos de ensayo le permite ejecutar 500 pocillos en formato de 96 pocillos o 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 50 µL (5 µL de muestra).
Nuestro kit de 5000 puntos de ensayo le permite ejecutar 5000 pocillos en formato de 96 o 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 50 µL (5 µL de muestra).

Características:

Pasos sin lavado, sin pasos de separación
Tecnología alternativa ELISA
Detección sensible
Amplia compatibilidad de muestras
Pequeño volumen de muestra
Resultados en menos de 4 horas

La tecnología AlphaLISA permite la detección de moléculas de interés en un ensayo cuantitativo sin lavado y de alta sensibilidad. En un ensayo AlphaLISA, un anticuerpo antianalito biotinilado se une a las microesferas donantes recubiertas de estreptavidina, mientras que otro anticuerpo antianalito se conjuga con las microesferas aceptoras AlphaLISA. En presencia del analito, las microesferas se aproximan. La excitación de las microesferas donantes provoca la liberación de moléculas de oxígeno singlete, lo que desencadena una cascada de transferencia de energía en las microesferas aceptoras, lo que resulta en un pico nítido de emisión de luz a 615 nm.
Cómo funciona
Principio del ensayo AlphaLISA de α-SMA en humanos y ratones
El ensayo AlphaLISA α-SMA se basa en un inmunoensayo tipo sándwich AlphaLISA que utiliza un anticuerpo antidiana biotinilado unido a microesferas donantes AlphaLISA recubiertas de estreptavidina y un anticuerpo antidiana conjugado a microesferas aceptoras AlphaLISA. Dos anticuerpos se dirigen contra la proteína α-SMA. En presencia de la diana, ambos anticuerpos se unen a α-SMA y las microesferas se aproximan. La excitación de las microesferas donantes provoca la liberación de moléculas de oxígeno singlete, lo que desencadena una cascada de transferencia de energía dentro de las microesferas aceptoras, lo que resulta en una emisión con λmax a 615 nm. La intensidad de la señal es directamente proporcional a la concentración de α-SMA presente en la muestra (lisado celular).

Protocolo del ensayo AlphaLISA de α-SMA en humanos y ratones
El ensayo AlphaLISA α-SMA puede ejecutarse en una placa de detección de 96 o 384 pocillos (50 µL final). Como se describe aquí, las muestras (lisados ​​celulares) o el lisado de control se dispensan directamente en la placa de ensayo para la detección de α-SMA con los reactivos AlphaLISA. No se requieren lavados. El protocolo puede miniaturizarse o ampliarse aún más simplemente ajustando proporcionalmente el tamaño de cada volumen añadido.
Aplicación: Cuantificación de proteínas
Compatible con automatización: Sí
Marca AlphaLISA
Modalidad de detección alfa
Tiempo de protocolo: 3 h a temperatura ambiente
Volumen de muestra: 5 µL
Condiciones de envío - Envío en Blue Ice
Objetivo-α-SMA
Biomarcadores de clase objetivo
Especie objetivo: ratón humano
Tecnología-Alfa
Área terapéutica - Esteatohepatitis no alcohólica (EHNA) cardiovascular/fibrosis
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo