Revvity, AL3210HV, kit de detección AlphaLISA LC3B-II para humanos y ratones, 100 puntos de ensayo

Descripción general
LC3 es un homólogo mamífero de la proteína ATG8 de levadura y se distribuye por todos los tejidos mamíferos y células cultivadas. LC3 es un componente clave del proceso de autofagia, un programa degradativo que mantiene la homeostasis celular. Durante la autofagia, los componentes citoplasmáticos como las proteínas citosólicas y los orgánulos son engullidos por los autofagosomas. Simultáneamente, una forma citosólica de LC3 (LC3-I) se conjuga con fosfatidiletanolamina para formar el conjugado LC3-fosfatidiletanolamina (LC3-II). Este conjugado recién formado es reclutado a las membranas autofagosómicas. La posterior fusión de los autofagosomas con los lisosomas da como resultado la formación de autolisosomas, y los componentes intraautofagosómicos son degradados por las hidrolasas lisosómicas. Al mismo tiempo, se degrada LC3-II dentro del lumen autolisosomal. Se ha descubierto que el nivel de LC3-II es proporcional a la abundancia de autofagosomas, lo que convierte a LC3-II en el marcador más popular de autofagia.
Formatos:

Nuestro kit de 100 puntos de ensayo le permite ejecutar 100 pocillos en formato de 96 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 100 µL (10 µL de muestra).
Nuestro kit de 500 puntos de ensayo le permite ejecutar 500 pocillos en formato de 96 pocillos o 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 50 µL (5 µL de muestra).
Nuestro kit de 5000 puntos de ensayo le permite ejecutar 5000 pocillos en formato de 96 o 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 50 µL (5 µL de muestra).

Características:

Pasos sin lavado, pasos sin separación
Tecnología alternativa ELISA
Detección sensible
Amplia compatibilidad de muestras
Pequeño volumen de muestra

La tecnología AlphaLISA permite la detección de moléculas de interés en un ensayo cuantitativo sin lavado y de alta sensibilidad. En un ensayo AlphaLISA, un anticuerpo antianalito biotinilado se une a las microesferas donantes recubiertas de estreptavidina, mientras que otro anticuerpo antianalito se conjuga con las microesferas aceptoras AlphaLISA. En presencia del analito, las microesferas se aproximan. La excitación de las microesferas donantes provoca la liberación de moléculas de oxígeno singlete, lo que desencadena una cascada de transferencia de energía en las microesferas aceptoras, lo que resulta en un pico nítido de emisión de luz a 615 nm.
Cómo funciona
Principio del kit de detección LC3B-II humano y de ratón AlphaLISA
El ensayo AlphaLISA LC3B-II humano y murino se basa en un inmunoensayo AlphaLISA tipo sándwich. Un anticuerpo anti-LC3B-II biotinilado se une a las microesferas donantes AlphaLISA recubiertas de estreptavidina, mientras que un anticuerpo anti-LC3B-II se conjuga con las microesferas aceptoras AlphaLISA.
En presencia de LC3B-II, las microesferas se aproximan. La excitación de las microesferas donantes provoca la liberación de moléculas de oxígeno singlete, lo que desencadena una cascada de transferencia de energía dentro de las microesferas aceptoras, lo que resulta en una emisión con λmax a 615 nm.

Protocolo del ensayo AlphaLISA LC3B-II humano y de ratón
El ensayo AlphaLISA Human and Mouse LC3B-II puede ejecutarse en una placa de detección de 96 o 384 pocillos (50 µL final). Como se describe aquí, las muestras (lisados ​​celulares o tisulares) o el lisado de control se dispensan directamente en la placa de ensayo para la detección de LC3B-II mediante reactivos AlphaLISA. No se requieren lavados. El protocolo puede miniaturizarse o ampliarse aún más simplemente ajustando proporcionalmente el volumen de cada adición.
Aplicación: Cuantificación de proteínas
Compatible con automatización: Sí
Marca AlphaLISA
Modalidad de detección alfa
Protocolo de tiempo: Noche a la mañana en RT
Volumen de muestra: 5 µL
Condiciones de envío - Envío en Blue Ice
Objetivo-LC3B-II
Biomarcadores de clase objetivo
Especie objetivo: ratón humano
Tecnología-Alfa
Tamaño de la unidad: 100 puntos de ensayo