Revvity, AL322HV, kit de detección de frataxina humana AlphaLISA, 100 puntos de ensayo

Descripción general
Formatos:

Nuestros kits HV (100 puntos de ensayo) le permiten ejecutar 100 pocillos en formato de 96 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 100 µL (10 µL de muestra).
Nuestro kit de 500 puntos de ensayo le permite ejecutar 500 pocillos en formato de 96 pocillos o 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 50 µL (5 µL de muestra).
Nuestro kit de 5000 puntos de ensayo le permite ejecutar 5000 pocillos en formato de 96 o 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 50 µL (5 µL de muestra).

Características:

Pasos sin lavado, pasos sin separación
Tecnología alternativa ELISA
Detección sensible
Amplia compatibilidad de muestras
Pequeño volumen de muestra
Resultados en menos de 3 horas
La mitad del tiempo de un ensayo ELISA

La frataxina se expresa como una proteína de 210 AA y 23 kDA del gen FXN, ubicado en el cromosoma 9. Tras su expresión, la proteína FXN se dirige a la mitocondria mediante su secuencia diana mitocondrial N-terminal de 41 AA. En la mitocondria, la proteína es escindida por la peptidasa de procesamiento mitocondrial (MPP) a su forma intermedia de 42-210 AA. Posteriormente, la MPP escinde la proteína a su forma madura de 81-210 AA. Aunque la función de la proteína FXN no está claramente definida, se cree que es de vital importancia para la biogénesis del grupo hierro-azufre, la biosíntesis del hemo y la quelación y el transporte de hierro específicamente involucrados con las mitocondrias. La proteína frataxina es la principal culpable de una enfermedad neurodegenerativa debilitante llamada ataxia de Friedreich. Debido a las similitudes entre las enfermedades, existe evidencia que sugiere que el FXN podría estar involucrado en otras enfermedades neurodegenerativas como el Parkinson, la esclerosis múltiple y la esclerosis lateral amiotrófica. Este kit AlphaLISA ha sido diseñado para la detección y cuantificación del FXN en lisados ​​celulares y tisulares.
La tecnología AlphaLISA permite la detección de moléculas de interés en un ensayo cuantitativo sin lavado y de alta sensibilidad. En un ensayo AlphaLISA, un anticuerpo antianalito biotinilado se une a las microesferas donantes recubiertas de estreptavidina, mientras que otro anticuerpo antianalito se conjuga con las microesferas aceptoras AlphaLISA. En presencia del analito, las microesferas se aproximan. La excitación de las microesferas donantes provoca la liberación de moléculas de oxígeno singlete, lo que desencadena una cascada de transferencia de energía en las microesferas aceptoras, lo que resulta en un pico nítido de emisión de luz a 615 nm.
Cómo funciona
Principio del ensayo AlphaLISA

El ensayo AlphaLISA se basa en un inmunoensayo tipo sándwich AlphaLISA que utiliza un anticuerpo antianalito biotinilado unido a microesferas donantes AlphaLISA recubiertas de estreptavidina y un anticuerpo antianalito conjugado a microesferas aceptoras AlphaLISA. Ambos anticuerpos se dirigen contra el analito de interés. En presencia de la diana, ambos anticuerpos se unen al analito y las microesferas se aproximan. La excitación de las microesferas donantes provoca la liberación de moléculas de oxígeno singlete, lo que desencadena una cascada de transferencia de energía dentro de las microesferas aceptoras, lo que resulta en una emisión con λmax a 615 nm. La intensidad de la señal es directamente proporcional a la concentración de analito presente en la muestra.

Protocolo del ensayo AlphaLISA

El ensayo AlphaLISA puede ejecutarse en una placa de detección de 96 o 384 pocillos (50 µL final). Como se describe aquí, las muestras o los estándares se dispensan directamente en la placa de ensayo para la detección del analito de interés mediante los reactivos AlphaLISA. No se requieren lavados. El protocolo puede miniaturizarse o ampliarse aún más simplemente ajustando proporcionalmente el volumen de cada adición.
Aplicación: Cuantificación de proteínas
Compatible con automatización: Sí
Marca AlphaLISA
Modalidad de detección alfa
Rango dinámico-8 - 300.000 pg/mL
Límite de detección: 8 pg/mL
Límite de cuantificación: 30 pg/mL
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 10 µL
Condiciones de envío - Envío en Blue Ice
Objetivo-Frataxina
Biomarcadores de clase objetivo
Especie objetivo: humanos
Tecnología-Alfa
Área terapéutica - Sistema nervioso central
Tamaño de la unidad: 100 puntos de ensayo