Revvity, AL348C, kit de unión AlphaLISA Human CD16a (FcgRIIIa, V158), 500 puntos de ensayo

Descripción general
Este kit está diseñado para detectar la actividad de unión entre FCGR3A humano (176Val) y el fragmento Fc de IgG humana mediante un ensayo AlphaLISA™ homogéneo (sin lavado). Este ensayo facilita el diseño y desarrollo de anticuerpos terapéuticos mediante la unión competitiva.
Características:

Pasos sin lavado, pasos sin separación
Facilidad de uso: pocos pasos adicionales, desarrollo rápido del ensayo
Amplia gama de afinidades: detecta interacciones fuertes o débiles, desde afinidad pM hasta mM
Distancia: mide complejos de proteínas o anticuerpos muy grandes, que abarcan hasta 200 nm o más
Alta avidez: los múltiples sitios de unión en cada perla permiten el uso de concentraciones nanomolares de anticuerpos o proteínas, así como el uso de aglutinantes de baja afinidad.

Estos kits utilizan microesferas aceptoras IgG Fc AlphaLISA™ y microesferas donantes recubiertas de estreptavidina para capturar FCGR3A humano biotinilado en un ensayo de competición. Las microesferas donantes y aceptoras se aproximan mediante la unión del fragmento Fc de IgG a FCGR3A. La excitación de las microesferas donantes provoca la liberación de oxígeno singlete, lo que desencadena una cascada de reacciones de transferencia de energía en las microesferas aceptoras, lo que resulta en un pico nítido de emisión de luz a 615 nm.
Los receptores Fc-Gamma (FCGR) pertenecen a la superfamilia de las inmunoglobulinas y desempeñan un papel fundamental en la función de los anticuerpos terapéuticos. Los FCGR se dividen en tres clases, y el FCGR3 (CD16) se expresa en dos formas distintas (FCGR3A y FCGR3B), codificadas por dos genes altamente homólogos diferentes de forma específica para cada tipo celular. El FCGR3A es un receptor de afinidad baja/intermedia para la IgG polivalente inmunocomplejada. Participa en la fagocitosis, la secreción de enzimas y mediadores inflamatorios, la citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC), la degranulación de mastocitos y la depuración de inmunocomplejos. En humanos, un polimorfismo de un solo nucleótido crea dos isoformas: una de alta unión (176Val/V158) y otra de baja unión (176Phe/F158) que, en homocigosis, pueden influir en la susceptibilidad a enfermedades autoinmunes o en la respuesta a anticuerpos IgG terapéuticos. El FCGR3A se ha considerado una diana terapéutica importante. Este ensayo AlphaLISA permite determinar la actividad de unión del fragmento Fc de IgG humana al FCGR3A humano y también permite estudiar cómo otros anticuerpos se unen al FCGR3A mediante un ensayo de competencia.
Interacción proteína-proteína-aplicación
Compatible con automatización: Sí
Marca AlphaLISA
Modalidad de detección alfa
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 10 µL
Condiciones de envío - Envío en Blue Ice
Objetivo-FCGR3A
Ensayo de unión de clase objetivo
Especie objetivo: humanos
Tecnología-Alfa
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo