Revvity, AL370F, kit de detección de E-cadherina humana AlphaLISA, 5000 puntos de ensayo

Descripción general
Formatos:

Nuestro kit de 100 puntos de ensayo le permite ejecutar 100 pocillos en formato de 96 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 100 µL (10 µL de muestra).
Nuestro kit de 500 puntos de ensayo le permite ejecutar 500 pocillos en formato de 96 pocillos o 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 50 µL (5 µL de muestra).
Nuestro kit de 5000 puntos de ensayo le permite ejecutar 5000 pocillos en formato de 96 o 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 50 µL (5 µL de muestra).

Características:

Pasos sin lavado, pasos sin separación
Tecnología alternativa ELISA
Detección sensible
Amplia compatibilidad de muestras
Pequeño volumen de muestra
Resultados en menos de 3 horas
La mitad del tiempo de un ensayo ELISA

La cadherina epitelial (E-cadherina), también conocida como cadherina-1 o uvomorulina (en ratones y ratas), es una proteína transmembrana de un solo paso que facilita la adhesión celular dependiente de calcio. Miembro de la familia de las cadherinas, la E-cadherina utiliza cinco dominios EC extracelulares para formar cúmulos cis entre células epiteliales adyacentes y cúmulos trans dentro de la misma célula. La escisión del dominio N-terminal por diversas proteasas es crucial para la motilidad celular y la supervivencia dependiente del EGFR. El dominio intracelular de la E-cadherina interactúa con numerosas proteínas, como la β-catenina, la α-catenina, la vinculina y la placoglobina. Se ha indicado la falta de unión a cualquiera de estas proteínas en la metástasis del cáncer.
La tecnología AlphaLISA permite la detección de moléculas de interés en un ensayo cuantitativo sin lavado y de alta sensibilidad. En un ensayo AlphaLISA, un anticuerpo antianalito biotinilado se une a las microesferas donantes recubiertas de estreptavidina, mientras que otro anticuerpo antianalito se conjuga con las microesferas aceptoras AlphaLISA. En presencia del analito, las microesferas se aproximan. La excitación de las microesferas donantes provoca la liberación de moléculas de oxígeno singlete, lo que desencadena una cascada de transferencia de energía en las microesferas aceptoras, lo que resulta en un pico nítido de emisión de luz a 615 nm.
Cómo funciona
Principio del ensayo AlphaLISA

El ensayo AlphaLISA se basa en un inmunoensayo tipo sándwich AlphaLISA que utiliza un anticuerpo antianalito biotinilado unido a microesferas donantes AlphaLISA recubiertas de estreptavidina y un anticuerpo antianalito conjugado a microesferas aceptoras AlphaLISA. Ambos anticuerpos se dirigen contra el analito de interés. En presencia de la diana, ambos anticuerpos se unen al analito y las microesferas se aproximan. La excitación de las microesferas donantes provoca la liberación de moléculas de oxígeno singlete, lo que desencadena una cascada de transferencia de energía dentro de las microesferas aceptoras, lo que resulta en una emisión con λmax a 615 nm. La intensidad de la señal es directamente proporcional a la concentración de analito presente en la muestra.

Protocolo del ensayo AlphaLISA

El ensayo AlphaLISA puede ejecutarse en una placa de detección de 96 o 384 pocillos (50 µL final). Como se describe aquí, las muestras o los estándares se dispensan directamente en la placa de ensayo para la detección del analito de interés mediante los reactivos AlphaLISA. No se requieren lavados. El protocolo puede miniaturizarse o ampliarse aún más simplemente ajustando proporcionalmente el tamaño de cada volumen añadido.
Aplicación: Cuantificación de proteínas
Compatible con automatización: Sí
Marca AlphaLISA
Modalidad de detección alfa
Rango dinámico: 3,5 - 300 000 pg/ml
Límite de detección: 3,5 pg/mL
Límite de cuantificación: 13,2 pg/mL
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 5 µL
Condiciones de envío - Envío en Blue Ice
Target-E-Cadherina
Biomarcadores de clase objetivo
Especie objetivo: humanos
Tecnología-Alfa
Área Terapéutica-Oncología
Tamaño de la unidad: 5000 puntos de ensayo