Revvity, AL505C, kit de detección de TNF-α en ratón AlphaLISA, 500 puntos de ensayo

Descripción general
Formatos:

Nuestro kit de 500 puntos de ensayo le permite ejecutar 500 pocillos en formato de 96 pocillos o 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 50 µL (5 µL de muestra).
Nuestro kit de 5000 puntos de ensayo le permite ejecutar 5000 pocillos en formato de 96 o 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 50 µL (5 µL de muestra).

Características:

Pasos sin lavado, pasos sin separación
Tecnología alternativa ELISA
Detección sensible
Amplia compatibilidad de muestras
Pequeño volumen de muestra
Resultados en menos de 3 horas
La mitad del tiempo de un ensayo ELISA

En ratones, el factor de necrosis tumoral alfa (TNFa) se produce principalmente como una proteína homotrimérica unida a la membrana de 235 aminoácidos. La forma homotrimérica madura soluble de 156 aminoácidos es luego liberada por la enzima convertidora de metaloproteasa TNFa. En humanos, el TNFa es producido por muchos tipos de células como macrófagos, monocitos, neutrófilos, células T y células NK. Provoca citólisis y citostasis de muchas líneas celulares tumorales in vitro. A las pocas horas de la inyección, el TNFa conduce a la destrucción de pequeños vasos sanguíneos dentro de tumores malignos. Aunque el TNFa inhibe el crecimiento de células endoteliales in vitro, es un potente promotor de la angiogénesis in vivo. A diferencia de los fármacos quimioterapéuticos, el TNFa ataca específicamente a las células malignas. Además, el TNFa se asocia con trastornos autoinmunes, y los anticuerpos dirigidos contra el TNFa han demostrado ser útiles.
La tecnología AlphaLISA permite la detección de moléculas de interés en un ensayo cuantitativo sin lavado y de alta sensibilidad. En un ensayo AlphaLISA, un anticuerpo antianalito biotinilado se une a las microesferas donantes recubiertas de estreptavidina, mientras que otro anticuerpo antianalito se conjuga con las microesferas aceptoras AlphaLISA. En presencia del analito, las microesferas se aproximan. La excitación de las microesferas donantes provoca la liberación de moléculas de oxígeno singlete, lo que desencadena una cascada de transferencia de energía en las microesferas aceptoras, lo que resulta en un pico nítido de emisión de luz a 615 nm.
Cómo funciona
Principio del ensayo AlphaLISA

El ensayo AlphaLISA se basa en un inmunoensayo tipo sándwich AlphaLISA que utiliza un anticuerpo antianalito biotinilado unido a microesferas donantes AlphaLISA recubiertas de estreptavidina y un anticuerpo antianalito conjugado a microesferas aceptoras AlphaLISA. Ambos anticuerpos se dirigen contra el analito de interés. En presencia de la diana, ambos anticuerpos se unen al analito y las microesferas se aproximan. La excitación de las microesferas donantes provoca la liberación de moléculas de oxígeno singlete, lo que desencadena una cascada de transferencia de energía dentro de las microesferas aceptoras, lo que resulta en una emisión con λmax a 615 nm. La intensidad de la señal es directamente proporcional a la concentración de analito presente en la muestra.

Protocolo del ensayo AlphaLISA

El ensayo AlphaLISA puede ejecutarse en una placa de detección de 96 o 384 pocillos (50 µL final). Como se describe aquí, las muestras o los estándares se dispensan directamente en la placa de ensayo para la detección del analito de interés mediante los reactivos AlphaLISA. No se requieren lavados. El protocolo puede miniaturizarse o ampliarse aún más simplemente ajustando proporcionalmente el tamaño de cada volumen añadido.
Aplicación: Cuantificación de proteínas
Compatible con automatización: Sí
Marca AlphaLISA
Modalidad de detección alfa
Rango dinámico: 2,0 - 30 000 pg/ml
Límite de detección: 2,0 pg/mL
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 5 µL
Condiciones de envío - Envío en Blue Ice
TNFα objetivo
Clase objetivo: citocinas
Especie objetivo: ratón
Tecnología-Alfa
Área terapéutica - Oncología de la inflamación
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo