Revvity, AL540F, AlphaLISA Kit de detección de homodímeros IL-17A de ratón, 5000 puntos de ensayo

Descripción general
Formatos:

Nuestros kits HV (100 puntos de ensayo) le permiten ejecutar 100 pocillos en formato de 96 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 100 µL (10 µL de muestra).
Nuestro kit de 500 puntos de ensayo le permite ejecutar 500 pocillos en formato de 96 pocillos o 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 50 µL (5 µL de muestra).
Nuestro kit de 5000 puntos de ensayo le permite ejecutar 5000 pocillos en formato de 96 o 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 50 µL (5 µL de muestra).

Características:

Pasos sin lavado, sin pasos de separación
Tecnología alternativa ELISA
Detección sensible
Amplia compatibilidad de muestras
Pequeño volumen de muestra
Resultados en menos de 3 horas
La mitad del tiempo de un ensayo ELISA

La interleucina-17 (IL-17), una citocina proinflamatoria producida en grandes cantidades exclusivamente por las células T, forma parte de una familia de al menos seis miembros (IL-17 A a F) de la familia IL-17. La IL-17A es una proteína homodímera glicosilada compuesta por dos cadenas A de 133 aminoácidos unidas por dos enlaces disulfuro. Actúa sobre fibroblastos y macrófagos uniéndose a sus receptores para inducir la secreción de otros mediadores proinflamatorios como TNF-α, IL-1β, IL-6 e IL-8. La IL-17 desempeña un papel fundamental en enfermedades autoinmunes como el lupus eritematoso, la artritis reumatoide, la psoriasis, la enfermedad inflamatoria intestinal, la esclerosis múltiple y las enfermedades inflamatorias de la piel. Por ello, se han desarrollado inhibidores como posibles tratamientos para muchas de estas enfermedades. La IL-17 también es un objetivo de las terapias antiinflamatorias para mejorar la recuperación tras un ictus y reducir el desarrollo del cáncer de piel. El presente kit permite la detección del homodímero de IL-17A de ratón (es decir, analito) en suero, plasma y sobrenadantes de cultivos celulares de ratón.
La tecnología AlphaLISA permite la detección de moléculas de interés en un ensayo cuantitativo sin lavado y de alta sensibilidad. En un ensayo AlphaLISA, un anticuerpo antianalito biotinilado se une a las microesferas donantes recubiertas de estreptavidina, mientras que otro anticuerpo antianalito se conjuga con las microesferas aceptoras AlphaLISA. En presencia del analito, las microesferas se aproximan. La excitación de las microesferas donantes provoca la liberación de moléculas de oxígeno singlete, lo que desencadena una cascada de transferencia de energía en las microesferas aceptoras, lo que resulta en un pico nítido de emisión de luz a 615 nm.
Cómo funciona
Principio del ensayo AlphaLISA

El ensayo AlphaLISA se basa en un inmunoensayo tipo sándwich AlphaLISA que utiliza un anticuerpo antianalito biotinilado unido a microesferas donantes AlphaLISA recubiertas de estreptavidina y un anticuerpo antianalito conjugado a microesferas aceptoras AlphaLISA. Ambos anticuerpos se dirigen contra el analito de interés. En presencia de la diana, ambos anticuerpos se unen al analito y las microesferas se aproximan. La excitación de las microesferas donantes provoca la liberación de moléculas de oxígeno singlete, lo que desencadena una cascada de transferencia de energía dentro de las microesferas aceptoras, lo que resulta en una emisión con λmax a 615 nm. La intensidad de la señal es directamente proporcional a la concentración de analito presente en la muestra.

Protocolo del ensayo AlphaLISA

El ensayo AlphaLISA puede ejecutarse en una placa de detección de 96 o 384 pocillos (50 µL final). Como se describe aquí, las muestras o los estándares se dispensan directamente en la placa de ensayo para la detección del analito de interés mediante los reactivos AlphaLISA. No se requieren lavados. El protocolo puede miniaturizarse o ampliarse aún más simplemente ajustando proporcionalmente el tamaño de cada volumen añadido.
Aplicación: Cuantificación de proteínas
Compatible con automatización: Sí
Marca AlphaLISA
Modalidad de detección alfa
Rango dinámico-1 - 300.000 pg/mL
Límite de detección: 3,5 pg/mL
Límite de cuantificación: 11,5 pg/mL
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 5 µL
Condiciones de envío - Envío en Blue Ice
Objetivo-IL17A
Clase objetivo: citocinas
Especie objetivo: ratón
Tecnología-Alfa
Área terapéutica-Inflamación
Tamaño de la unidad: 5000 puntos de ensayo