Revvity, AL550F, kit de detección de IFN-α en ratón AlphaLISA, 5000 puntos de ensayo

Descripción general
Formatos:

Nuestro kit de 100 puntos de ensayo le permite ejecutar 100 pocillos en formato de 96 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 100 µL (10 µL de muestra).
Nuestro kit de 500 puntos de ensayo le permite ejecutar 500 pocillos en formato de 96 pocillos o 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 50 µL (5 µL de muestra).
Nuestro kit de 5000 puntos de ensayo le permite ejecutar 5000 pocillos en formato de 96 o 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 50 µL (5 µL de muestra).

Características:

Pasos sin lavado, sin pasos de separación
Tecnología alternativa ELISA
Detección sensible
Amplia compatibilidad de muestras
Pequeño volumen de muestra
Resultados en menos de 3 horas
La mitad del tiempo de un ensayo ELISA

El interferón alfa (IFN-α) es una citocina que participa en la respuesta inmunitaria innata contra las infecciones virales. Es producido por leucocitos y otros tipos celulares, como las células dendríticas plasmocitoides. Existen numerosos subtipos de IFN-α, con pesos moleculares que oscilan entre 15 y 21 kDa. Todos poseen la misma actividad antiviral, pero pueden diferir en sus actividades biológicas relativas. El IFN-α también exhibe diversas actividades antiproliferativas y antitumorales, lo que lo convierte en una de las citocinas más utilizadas en el tratamiento de pacientes con cáncer, como la leucemia de células pilosas, el carcinoma renal, el sarcoma de Kaposi y otras neoplasias malignas. En condiciones fisiológicas, se detecta un nivel bajo de IFN-α. Sin embargo, su producción aumenta notablemente durante infecciones y diversas situaciones patológicas, lo que lo convierte en un importante marcador de enfermedad.
La tecnología AlphaLISA permite la detección de moléculas de interés en un ensayo cuantitativo sin lavado y de alta sensibilidad. En un ensayo AlphaLISA, un anticuerpo antianalito biotinilado se une a las microesferas donantes recubiertas de estreptavidina, mientras que otro anticuerpo antianalito se conjuga con las microesferas aceptoras AlphaLISA. En presencia del analito, las microesferas se aproximan. La excitación de las microesferas donantes provoca la liberación de moléculas de oxígeno singlete, lo que desencadena una cascada de transferencia de energía en las microesferas aceptoras, lo que resulta en un pico nítido de emisión de luz a 615 nm.
Cómo funciona
Principio del ensayo AlphaLISA

El ensayo AlphaLISA se basa en un inmunoensayo tipo sándwich AlphaLISA que utiliza un anticuerpo antianalito biotinilado unido a microesferas donantes AlphaLISA recubiertas de estreptavidina y un anticuerpo antianalito conjugado a microesferas aceptoras AlphaLISA. Ambos anticuerpos se dirigen contra el analito de interés. En presencia de la diana, ambos anticuerpos se unen al analito y las microesferas se aproximan. La excitación de las microesferas donantes provoca la liberación de moléculas de oxígeno singlete, lo que desencadena una cascada de transferencia de energía dentro de las microesferas aceptoras, lo que resulta en una emisión con λmax a 615 nm. La intensidad de la señal es directamente proporcional a la concentración de analito presente en la muestra.

Protocolo del ensayo AlphaLISA

El ensayo AlphaLISA puede ejecutarse en una placa de detección de 96 o 384 pocillos (50 µL final). Como se describe aquí, las muestras o los estándares se dispensan directamente en la placa de ensayo para la detección del analito de interés mediante los reactivos AlphaLISA. No se requieren lavados. El protocolo puede miniaturizarse o ampliarse aún más simplemente ajustando proporcionalmente el tamaño de cada volumen añadido.
Aplicación: Cuantificación de proteínas
Compatible con automatización: Sí
Marca AlphaLISA
Modalidad de detección alfa
Rango dinámico-171 - 100.000 pg/mL
Límite de detección: 171 pg/mL
Límite de cuantificación: 419 pg/mL
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 5 µL
Condiciones de envío - Envío en Blue Ice
IFNα objetivo
Clase objetivo: citocinas
Especie objetivo: ratón
Tecnología-Alfa
Tamaño de la unidad: 5000 puntos de ensayo