Product Description
Descripción general
El receptor tirosina-proteína quinasa erbB3, también conocido como HER3 (receptor 3 del factor de crecimiento epidérmico humano), es una proteína unida a la membrana codificada por el gen ERBB3. ErbB3 posee un dominio de unión a neuregulina; sin embargo, no posee un dominio quinasa activo y, por lo tanto, puede unirse a este ligando, pero no puede transmitir la señal a la célula mediante la fosforilación proteica. ErbB3 forma heterodímeros con otros miembros de la familia de receptores de EGF con actividad quinasa. La heterodimerización activa las vías que desencadenan la proliferación o diferenciación celular. La sobreexpresión de ErbB3 es un indicador de mal pronóstico en el cáncer de mama y también se ha descrito en otros cánceres como el de próstata y vejiga.
El kit de detección AlphaLISA SureFire Ultra Human Phospho-ErbB3 (Tyr1289) es un inmunoensayo tipo sándwich para la detección cuantitativa de fosfo-ErbB3 (Tyr 1289) en lisados celulares, utilizando tecnología Alpha.
Formatos
El kit HV (alto volumen) contiene reactivos para ejecutar 100 pocillos en formato de 96 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 60 μL.
El kit de 500 puntos contiene suficientes reactivos para ejecutar 500 pocillos en formato de 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 20 μL.
El kit de 10 000 puntos contiene suficientes reactivos para ejecutar 10 000 pocillos en formato de 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 20 μL.
El kit de 50.000 puntos contiene suficientes reactivos para ejecutar 50.000 pocillos en formato de 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 20 μL.
Los kits AlphaLISA SureFire Ultra son compatibles con
Lisados de células y tejidos
Moduladores de anticuerpos
Anticuerpos bioterapéuticos
Los kits Alpha SureFire se pueden utilizar para
Ensayos de quinasas celulares
Estudios de activación de receptores
Cribado
Cómo funciona
Principio del ensayo Phospho-AlphaLISA SureFire Ultra
El ensayo Phospho-AlphaLISA SureFire Ultra mide un objetivo proteico cuando se fosforila en un residuo específico.
El ensayo utiliza dos anticuerpos que reconocen el epítopo fosforilado y un epítopo distal de la proteína diana. Los ensayos AlphaLISA requieren dos tipos de microesferas: aceptoras y donantes. Las microesferas aceptoras están recubiertas con un agente patentado CaptSure™ para inmovilizar específicamente el anticuerpo específico del ensayo, marcado con una etiqueta CaptSure. Las microesferas donantes están recubiertas con estreptavidina para capturar uno de los anticuerpos de detección, que está biotinilado. En presencia de proteína fosforilada, los dos anticuerpos acercan las microesferas donadora y aceptora, por lo que el oxígeno singlete transfiere energía para excitar la microesfera aceptora, lo que permite la generación de una señal alfa luminiscente. La cantidad de emisión de luz es directamente proporcional a la cantidad de fosfoproteína presente en la muestra.
Protocolo de ensayo de dos placas Phospho-AlphaLISA SureFire Ultra
El protocolo de dos placas implica el cultivo y tratamiento de las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis, y la posterior transferencia de los lisados a una placa OptiPlate™ de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección Phospho-AlphaLISA SureFire Ultra. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia celular. Además, los lisados de un solo pocillo pueden utilizarse para medir múltiples dianas.
Protocolo de ensayo de una placa Phospho-AlphaLISA SureFire Ultra
La detección de la proteína diana fosforilada con los reactivos AlphaLISA SureFire Ultra se puede realizar en una sola placa, utilizada para cultivo, tratamiento y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado para HTS, permite la miniaturización manteniendo la calidad de AlphaLISA SureFire Ultra.
Aplicación: Señalización celular
Compatible con automatización: Sí
Marca AlphaLISA SureFire Ultra
Modalidad de detección alfa
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis
Modificación molecular-fosforilación
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 10 µL
Condiciones de envío - Envío en Blue Ice
Objetivo-ErbB3
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: humanos
Tecnología-Alfa
Área Terapéutica-Oncología
Tamaño de la unidad: 50.000 puntos de ensayo
Order Guidelines
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Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
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