Product Description
Descripción general
La SYK (tirosina quinasa del bazo) es una tirosina quinasa no receptora crucial en diversas vías de señalización, en particular en la activación y regulación de las células inmunitarias. Tanto en humanos como en ratones, la SYK desempeña un papel fundamental en diversos procesos celulares, como la señalización del receptor de linfocitos B (BCR), la señalización del receptor Fc y las respuestas mediadas por integrinas. La activación de la SYK se produce mediante la fosforilación en residuos clave de tirosina, siendo Tyr525/526 particularmente importante para la actividad completa de la quinasa y la señalización posterior. La señalización de la SYK se relaciona frecuentemente con diversas enfermedades, especialmente neoplasias hematológicas, trastornos autoinmunes, enfermedades alérgicas y enfermedades neurodegenerativas, donde la activación aberrante de la vía contribuye a la progresión de la enfermedad y a la desregulación inmunitaria.
El kit de detección AlphaLISA SureFire Ultra Human & Mouse Phospho-SYK (Tyr525/526) es un inmunoensayo sándwich sensible diseñado para la detección cuantitativa de SYK fosforilada (Tyr525/526) en lisados celulares de muestras humanas y de ratón, utilizando tecnología Alpha.
Formatos:
El kit HV (alto volumen) contiene reactivos para ejecutar 100 pocillos en formato de 96 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 60 μL.
El kit de 500 puntos contiene suficientes reactivos para ejecutar 500 pocillos en formato de 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 20 μL.
El kit de 10 000 puntos contiene suficientes reactivos para ejecutar 10 000 pocillos en formato de 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 20 μL.
El kit de 50.000 puntos contiene suficientes reactivos para ejecutar 50.000 pocillos en formato de 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 20 μL.
Los kits AlphaLISA SureFire Ultra son compatibles con:
Lisados de células y tejidos
Moduladores de anticuerpos
Anticuerpos bioterapéuticos
Los kits Alpha SureFire se pueden utilizar para:
Ensayos de quinasas celulares
Estudios de activación de receptores
Cribado
Cómo funciona
Principio del ensayo Phospho-AlphaLISA SureFire Ultra
El ensayo Phospho-AlphaLISA SureFire Ultra mide un objetivo proteico cuando se fosforila en un residuo específico.
El ensayo utiliza dos anticuerpos que reconocen el epítopo fosforilado y un epítopo distal de la proteína diana. Los ensayos AlphaLISA requieren dos tipos de microesferas: aceptoras y donantes. Las microesferas aceptoras están recubiertas con un agente patentado CaptSure™ para inmovilizar específicamente el anticuerpo específico del ensayo, marcado con una etiqueta CaptSure. Las microesferas donantes están recubiertas con estreptavidina para capturar uno de los anticuerpos de detección, que está biotinilado. En presencia de proteína fosforilada, los dos anticuerpos acercan las microesferas donadora y aceptora, por lo que el oxígeno singlete transfiere energía para excitar la microesfera aceptora, lo que permite la generación de una señal alfa luminiscente. La cantidad de emisión de luz es directamente proporcional a la cantidad de fosfoproteína presente en la muestra.
Protocolo de ensayo de dos placas Phospho-AlphaLISA SureFire Ultra
El protocolo de dos placas implica el cultivo y tratamiento de las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis, y la posterior transferencia de los lisados a una placa OptiPlate™ de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección Phospho-AlphaLISA SureFire Ultra. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia celular. Además, los lisados de un solo pocillo pueden utilizarse para medir múltiples dianas.
Protocolo de ensayo de una placa Phospho-AlphaLISA SureFire Ultra
La detección de la proteína diana fosforilada con los reactivos AlphaLISA SureFire Ultra se puede realizar en una sola placa, utilizada para cultivo, tratamiento y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado para HTS, permite la miniaturización manteniendo la calidad de AlphaLISA SureFire Ultra.
Aplicación: Señalización celular
Compatible con automatización: Sí
Marca AlphaLISA SureFire Ultra
Modalidad de detección alfa
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis
Modificación molecular-fosforilación
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 10 µL
Condiciones de envío - Envío en Blue Ice
Objetivo-SYK
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: ratón humano
Tecnología-Alfa
Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo
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Collaboration
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