Revvity, ASBF-AIRF5-A500, AlphaLISA SureFire Ultra Human IRF5 Biotin Free Aggregation Kit, 500 puntos de ensayo

Descripción general
El factor regulador del interferón 5 (IRF5) es un factor de transcripción que participa en la inmunidad innata y las respuestas inflamatorias, regulando la expresión de interferones tipo I (IFN-alfa e IFN-beta) y citocinas proinflamatorias. Activado por receptores de reconocimiento de patrones como los receptores tipo Toll (TLR), MDA5 o STING en respuesta a una infección viral, el IRF5 desempeña un papel crucial en la defensa antiviral. En su forma inactiva, el IRF5 reside en el citoplasma de las células no infectadas. Tras su activación, sufre fosforilación, dimerización y localización nuclear para impulsar la expresión génica. La desregulación del IRF5 se relaciona con enfermedades autoinmunes como el lupus y la artritis reumatoide, así como con cánceres inflamatorios, donde modula los macrófagos asociados a tumores.
El kit de detección de agregados de IRF5 humano sin biotina AlphaLISA SureFire es un inmunoensayo tipo sándwich para la detección cuantitativa de agregados de IRF5 en lisados ​​celulares, utilizando tecnología Alpha.
Formatos:

El kit HV (alto volumen) contiene reactivos para ejecutar 100 pocillos en formato de 96 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 60 μL.
El kit de 500 puntos contiene suficientes reactivos para ejecutar 500 pocillos en formato de 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 20 μL.
El kit de 10 000 puntos contiene suficientes reactivos para ejecutar 10 000 pocillos en formato de 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 20 μL.
El kit de 50.000 puntos contiene suficientes reactivos para ejecutar 50.000 pocillos en formato de 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 20 μL.

Los kits AlphaLISA SureFire Ultra son compatibles con:

Lisados ​​de células y tejidos
Moduladores de anticuerpos
Anticuerpos bioterapéuticos

Los kits AlphaLISA SureFire Ultra se pueden utilizar para:

Ensayos de quinasas celulares
Estudios de activación de receptores
Cribado de alto rendimiento para estudios preclínicos
Cómo funciona
Principio del ensayo de agregación AlphaLISA SureFire Biotin Free
El ensayo de agregación AlphaLISA SureFire Biotin Free utiliza un único anticuerpo que reconoce un epítopo expuesto en la proteína diana agregada, conjugado con una etiqueta CaptSure™ o CaptSure3. Los ensayos AlphaLISA requieren dos tipos de microesferas: aceptoras y donantes. Las microesferas aceptoras están recubiertas con un agente CaptSure patentado para inmovilizar específicamente el anticuerpo marcado con la etiqueta CaptSure. Las microesferas donantes están recubiertas con un agente CaptSure3 patentado para capturar el anticuerpo marcado con la etiqueta CaptSure3. En presencia de la proteína diana agregada, las microesferas donadoras y aceptoras se aproximan, de modo que el oxígeno singlete transfiere energía para excitar la microesfera aceptora, lo que permite la generación de una señal alfa luminiscente. La cantidad de luz emitida es directamente proporcional a la cantidad de proteína agregada presente en la muestra.

Protocolo de ensayo de agregación de dos placas con AlphaLISA SureFire Biotin Free
El protocolo de dos placas implica el cultivo y tratamiento de las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis, y la posterior transferencia de los lisados ​​a una placa Optiplate de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección Aggregation-AlphaLISA SureFire Biotin Free. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia celular. Además, los lisados ​​de un solo pocillo pueden utilizarse para medir múltiples dianas.

Protocolo de ensayo de agregación de una placa con AlphaLISA SureFire Biotin Free
La detección de la proteína diana agregada con los reactivos AlphaLISA SureFire Biotin Free se puede realizar en una sola placa para cultivo, tratamiento y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado para HTS, permite la miniaturización manteniendo la robusta calidad de AlphaLISA SureFire Ultra.
Aplicación: Señalización celular
Compatible con automatización: Sí
Marca AlphaLISA SureFire sin biotina
Modalidad de detección alfa
Kit de grupo de productos
Tiempo de protocolo: 2 h a temperatura ambiente
Volumen de muestra: 10 µL
Condiciones de envío - Envío en Blue Ice
Objetivo-IRF5
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: humanos
Tecnología-Alfa
Área terapéutica-Inflamación
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo