Revvity, C1PU1V2, línea celular estable del receptor de vasopresina V2 Tag-lite (HEK293)

Descripción general
Existen tres subtipos de receptor de vasopresina: V1A, V1B y V2. El receptor V2 se encuentra principalmente en el riñón y es importante para la reabsorción de agua libre.
Esta línea celular estable HEK293 expresa el receptor V2 fusionado a una etiqueta SNAP. Marcadas con terbio, las células pueden utilizarse en un protocolo de unión al receptor Tag-lite.
Los ensayos Tag-lite ofrecen muchas características y aplicaciones en comparación con los ensayos tradicionales de unión de receptor/ligando:

No radiactivo
Homogéneo y sin filtración
Kits y reactivos listos para usar para ensayos de unión
No altera la farmacología del receptor.
Tecnología validada y revisada por pares
Estudios cinéticos exhaustivos con valores reales de Kd y Ki, constantes de velocidad de asociación (Kon) y disociación (Koff)
Cribado y elaboración de perfiles de productos biológicos y moléculas grandes
Cómo funciona
Paso 1 - Etiquetado del receptor
SNAP-tag® es una pequeña etiqueta de fusión que interactúa covalentemente con sustratos específicos. Permite el marcaje covalente específico de cualquier proteína de interés. Para más detalles, consulte el procedimiento de marcaje.

Paso 2: Comprender el principio del ensayo
Realizar un ensayo de unión al receptor con Tag-lite es facilísimo. Simplemente dispense 10 µL de células marcadas en cada pocillo, seguido de 5 µL de ligando marcado y 5 µL del compuesto que desea analizar. Como todos los ensayos HTRF, los ensayos Tag-lite no requieren lavado. A la derecha se muestra un diagrama del procedimiento.

Paso 3 - Unión de saturación (KD)
Un ensayo de unión por saturación mide la unión total e inespecífica para concentraciones crecientes de ligando en condiciones de equilibrio. Para realizar el ensayo, el ligando fluorescente se titula en una solución que contiene una cantidad fija de células marcadas y se incuba hasta alcanzar el equilibrio. El índice HTRF obtenido de esta titulación es la unión total.

Paso 4 - Enlace competitivo (KI)
Se realiza un ensayo de unión competitiva para medir la constante de disociación, Ki. Para realizar el ensayo, el compuesto se titula en una solución que contiene una concentración fija de ligando fluorescente y una cantidad fija de células. Aplicación: Unión Receptor-Ligando.
Etiqueta de marca ligera
Modalidad de detección-HTRF
Grupo de productos - Células
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo-GPCR
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica - Enfermedades infecciosas cardiovasculares Metabolismo/Diabetes EHNA/Fibrosis Neurociencia Oncología e inflamación Enfermedades raras
Tamaño de la unidad: 1 vial