Sartorius, BA-04877, Kit de etiquetado Incucyte® Exofluor Green EV

Un kit que contiene un (1) vial de colorante de etiquetado Incucyte® Exofluor Green EV liofilizado, diez (10) concentradores Vivaspin® 2 y diez (10) filtros Minisart® PES de 0,22 µm, adecuados para diez reacciones de etiquetado.
Características principales del kit de etiquetado Incucyte® Exofluor Green EV
Etiquetar las EV para observar y evaluar los cambios cinéticos en la captación intracelular de EV

Las vesículas extracelulares (VE) son partículas heterogéneas unidas a lípidos (50-1000 nm) secretadas naturalmente por las células al espacio extracelular. Los exosomas, una subclase de VE, se definen por su tamaño (40 a 160 nm) y biogénesis (origen endosómico). Las VE, que transportan biomoléculas como proteínas, lípidos y ácidos nucleicos, son de interés para los investigadores con fines diagnósticos y terapéuticos. El kit de etiquetado de VE Incucyte® Exofluor Green permite la evaluación en tiempo real de la captación celular de VE y está validado para su uso con el sistema de análisis de células vivas Incucyte®. El colorante de etiquetado de VE Incucyte® Exofluor Green marca la membrana plasmática de VE pequeñas mediante la unión covalente a proteínas y aminoácidos. La unión irreversible a las VE, junto con la eliminación del colorante libre, reduce el riesgo de fijación inespecífica del colorante a otras membranas plasmáticas.
El kit de etiquetado de EV Incucyte® Exofluor Green está diseñado para etiquetar EV, como exosomas, para su investigación en ensayos con células vivas mediante el sistema de análisis de células vivas Incucyte®. El kit incluye el colorante de etiquetado de EV Incucyte® Exofluor Green, concentradores Vivaspin®2 para la eliminación del colorante libre y filtros Minisart® PES de 0,22 µm para la esterilización y la eliminación del colorante agregado no unido. Tras el procesamiento, las EV marcadas se añaden a las células y se mide su captación cuantificando la fluorescencia verde. El kit es compatible con EV aisladas mediante diversos métodos y contiene componentes para 10 reacciones de etiquetado. Está diseñado para su uso en los sistemas de análisis de células vivas Incucyte® SX5, S3 o SX1 configurados con un módulo óptico verde/rojo o verde/naranja/NIR.
Uso recomendado
Recomendamos preparar el colorante de marcado Incucyte® Exofluor Green EV a una concentración madre de 5 mM con DMSO anhidro (no suministrado). Posteriormente, el colorante debe diluirse 1:10 con solución salina tamponada con fosfato (libre de Ca²+/Mg²+) y utilizarse a una concentración final de 80 μM en una reacción de marcado de 30 minutos. El volumen de EV necesario para cada reacción depende del número de pocillos de ensayo y de la concentración de EV por pocillo. El rango recomendado de EV es de 1 a 4 μg de proteína/pocillo o de 5 x 10⁷ a 1 x 10⁹ partículas/pocillo. Estos rangos se han validado mediante pruebas con una amplia gama de métodos de extracción de exosomas; sin embargo, puede requerirse cierta optimización. Las columnas Vivaspin® 2 se utilizan para eliminar el colorante no marcado de las EV marcadas, con una carga máxima de 40 μg de proteína o 100 μl de muestra de EV marcada. Superar estos límites puede causar la obstrucción de la membrana o un aumento de la fluorescencia de fondo. Tras eliminar el colorante libre, se utiliza un filtro de jeringa Minisart® PES de 0,22 µm para la esterilización y la eliminación de los agregados no unidos.

Presupuesto
Aplicaciones:
Aplicación: Investigación de EV/exosomas
Tipo de ensayo: Marcado EV

Características:
Compatibilidad de dispositivos/instrumentos: S3; SX1; SX5
Módulo óptico: Verde/Rojo; Verde/Naranja/NIR

Especificaciones generales:
Color: Verde

Información del producto:
Marca: Incucyte®