Recipientes para muestras de boca estrecha Bio-Tite™ de 90 ml (3 oz) y 48 mm de Thermo Fisher, 020148, Samco™

No estéril, sin lengüeta, amarillo, 400/Cs. El kit EMSA quimioluminiscente Thermo Scientific LightShift es un sistema extremadamente robusto y sensible para realizar ensayos de desplazamiento de movilidad electroforética (EMSA) para identificar y caracterizar las interacciones de unión proteína-ADN. El kit incluye reactivos para configurar y personalizar las reacciones de unión al ADN, un conjunto de control de ADN y extracto de proteína para probar el sistema del kit, un conjugado estabilizado de estreptavidina-HRP para sondear la diana de ADN marcada con biotina y un módulo de sustrato quimioluminiscente excepcionalmente sensible para la detección. Características del kit EMSA quimioluminiscente LightShift:
• Excelente para detectar proteínas de baja abundancia en extractos nucleares.
• Sensibilidad que supera los métodos radiactivos y de digoxigenina.
• Compatible con condiciones de unión previamente establecidas para interacciones populares entre ADN y proteína
Incluye el sistema de control EBNA para ayudar a los nuevos usuarios a desarrollar un ensayo funcional y comprender los métodos utilizados para confirmar la especificidad de la interacción de unión. El principio de la detección LightShift EMSA es similar al de un Western blot. El ADN dúplex marcado con biotina se incuba con un extracto nuclear o factor purificado y se somete a electroforesis en un gel nativo. A continuación, el ADN se transfiere rápidamente (30 minutos) a una membrana de nailon positiva, se reticula mediante UV, se sonda con un conjugado de estreptavidina-HRP y se incuba con el sustrato. El protocolo, desde el marcaje hasta la obtención de los resultados, se puede completar en un solo día. La interacción de las proteínas con el ADN es fundamental para el control de numerosos procesos celulares, como la replicación, la recombinación y la reparación del ADN, la transcripción y el ensamblaje viral. Una técnica fundamental para estudiar la regulación génica y determinar las interacciones proteína-ADN es el ensayo de desplazamiento de movilidad electroforética (EMSA). La técnica EMSA se basa en la observación de que los complejos proteína-ADN migran más lentamente que las moléculas de ADN libre cuando se someten a electroforesis en gel de poliacrilamida o agarosa no desnaturalizante. Debido a que la velocidad de migración del ADN se modifica o retarda al unirse a la proteína, este ensayo también se conoce como ensayo de desplazamiento en gel o de retardo en gel. Hasta la creación del EMSA, las interacciones proteína-ADN se estudiaban principalmente mediante ensayos de unión a filtros de nitrocelulosa. Para realizar el ensayo, solo se necesita una diana de ADN purificada, marcada con biotina en sus extremos, el extracto proteico a analizar, una membrana de nailon y un equipo básico de electroforesis. Las dianas de ADN pueden sintetizarse con marcadores de biotina 5' o 3' o marcarse tras la síntesis con el kit de marcado de ADN con biotina en el extremo 3' de Thermo Scientific (n.° de producto 89818). Se pueden obtener extractos de proteínas nucleares, citosólicas o de células completas mediante diversos métodos, incluido el kit de reactivos de extracción nuclear y citoplasmática Thermo Scientific NE-PER (n.° de producto 78833). Más información del producto.
•Transfiera geles EMSA utilizando el Pierce G2 Fast BlotterEnsayo: Ensayo EMSA
Número de reacciones: 100
Línea de productos: LightShift™
Tipo de producto: Kit de ensayo de interacción de unión proteína-ADN
Cantidad: 100 Reacciones
Especificidad del objetivo: No específico del objetivo
Técnica: Quimioluminiscencia mejorada, transferencia de membrana, desplazamiento de gel
Método de detección: quimioluminiscente
Formato: Kit
Tamaño de la unidad: 100 reacciones