Thermo Fisher, 11153D, Dynabeads™ CD45

Dynabeads™ CD45: Las perlas Dynabeads CD45 son perlas superparamagnéticas uniformes (4,5 μm de diámetro) recubiertas con un anticuerpo monoclonal primario de ratón IgG2a específico para todas las isoformas conocidas de CD45, una glicoproteína de membrana presente en todos los leucocitos humanos. Las perlas Dynabeads CD45 permiten aislar o depletar de forma fácil y eficiente las células CD45-positivas de muestras viscosas, como sangre completa y médula ósea, en aproximadamente 30 minutos. Las células aisladas pueden utilizarse posteriormente para estudios moleculares o proteómicos. En la investigación oncológica, la depleción de células CD45+ se utiliza a menudo para enriquecer las células tumorales epiteliales circulantes (CTC) en muestras de biopsia líquida, como células mononucleares de sangre periférica (PBMC) y sangre completa, con el fin de obtener CTC intactas y viables para estudios de detección y cuantificación. Las CTC intactas pueden sedimentarse y lisarse directamente con el kit TaqMan Cells-to-CT Express. Los beneficios de las perlas Dynabeads CD45 incluyen:
• Aislamiento eficiente de leucocitos humanos de sangre completa o médula ósea
• Enriquecimiento de CTC viables e intactas mediante depleción de leucocitos
• Script automatizado disponible para el enriquecimiento de CTC de alto rendimiento en el instrumento KingFisher Apex. Enriquecimiento de CTC mediante Dynabeads mediante depleción de CD45. Para el enriquecimiento de CTC, se añaden Dynabeads CD45 Beads a la muestra de PBMC bajo agitación continua durante 30 minutos para optimizar la unión de Dynabeads a los leucocitos. A continuación, la muestra se coloca en un imán DynaMag durante menos de 2 minutos para separar los leucocitos unidos a las microesferas de las CTC enriquecidas. El sobrenadante que contiene las CTC enriquecidas se transfiere a un nuevo tubo y se desechan los leucocitos unidos a las microesferas. Si se enriquecen CTC directamente a partir de sangre completa, los eritrocitos deben lisarse antes de la depleción de CD45. Si la muestra contiene una gran cantidad de granulocitos contaminantes, se pueden añadir Dynabeads CD15 Beads para mejorar la eficiencia de la depleción de granulocitos. Aislamiento negativo de alto rendimiento de CTC en el sistema de purificación KingFisher Apex. El enriquecimiento de CTC circulantes es un proceso laborioso si se trabaja con muchas muestras en paralelo y puede generar un mayor número de errores en la manipulación manual. Esto se puede evitar automatizando el flujo de trabajo con el sistema de purificación KingFisher Apex, que cuenta con placas de 96 pocillos profundos. Gracias a la automatización, se puede lograr una recuperación de alto rendimiento de CTC intactas en aproximadamente 50 minutos tras cargar la muestra y los reactivos en las placas. Las CTC resultantes son viables y aptas para el cultivo y el análisis molecular o proteómico posterior. Las ventajas del enriquecimiento automatizado de CTC mediante la depleción de CD45 con Dynabeads incluyen:
• Reducción del tiempo de trabajo práctico
• Alta reproducibilidad debido a menos errores de manipulación manual
• Mayor rendimiento
• Recuperación de una población heterogénea de CTC. Estrategias alternativas de aislamiento positivo para CTC. Si se prefiere aislar positivamente las CTC para aplicaciones moleculares posteriores, como la RT-qPCR, recomendamos usar Dynabeads Epithelial Enrich (EpCAM). Para aislar positivamente las CTC sin microesferas para aplicaciones inmunológicas, como el cultivo celular o la citometría de flujo, recomendamos usar Dynabeads CELLection Epithelial Enrich (EpCAM). Si utiliza su propio anticuerpo biotinilado, recomendamos usar Dynabeads MyOne Streptavidin T1. Suministro comercial. Nuestras plantas de fabricación cuentan con la certificación ISO 13485. Las características de las microesferas y las condiciones de fabricación garantizan la consistencia y la reproducibilidad de los lotes, lo que las hace ideales para el suministro comercial. Si está personalizando las microesferas Dynabeads CD45 para un producto o servicio comercial, o necesita un mayor volumen de este producto, contáctenos en oemdynal@lifetech.com o consulte nuestra página de fabricantes de equipos originales (OEM) de Dynabeads. Tipo de célula: células tumorales, leucocitos
Tecnología de aislamiento: agotamiento, aislamiento positivo para aplicaciones moleculares
Número de células: Procesos ∼5 x 108 células en total
Viabilidad de salida: >95%
Línea de productos: DYNAL™, Dynabeads™
Grado de pureza o calidad: Grado de investigación
Cantidad: 5 mL
Tipo de muestra: PBMC, sangre
Condición de envío: Temperatura ambiente
Material de partida N.° de celda: 1 x 107 PBMC por aislamiento
Especie objetivo: humanos
Diámetro (métrico): 4,5 μm
Tipo de producto: Perla recubierta de anticuerpos
Tamaño de la unidad: cada una