Kit de ensayo de luciferasa gaussia Pierce™, Thermo Fisher, 16161

1000 reacciones. El kit de ensayo de brillo de luciferasa de Gaussia de Thermo Scientific Pierce proporciona un sistema de bioluminiscencia sensible para determinar la expresión de un gen de interés con un reportero de luciferasa. La señal de bioluminiscencia extremadamente brillante y estable (vida media superior a 1 hora) se produce en presencia del reportero de luciferasa Gaussia-Dura debido a la oxidación del sustrato de luciferasa, la coelenterazina (Figura 1). La luciferasa de Gaussia es una proteína de 20 kDa del copépodo marino, Gaussia princeps, que tiene mayor estabilidad proteica y brillo de señal que la luciferasa de luciérnaga y la luciferasa nativa de Renilla. La enzima bioluminiscente se secreta en gran medida en el medio de cultivo celular, lo que permite el monitoreo de la actividad del reportero en células vivas. La salida de luz generada por la reacción de luciferasa puede correlacionarse con la cantidad de proteína luciferasa de Gaussia producida y usarse para determinar la actividad del promotor que impulsa la expresión de Gaussia.
Características del kit de ensayo de brillo de luciferasa de Gaussia:
•Sensible: detección altamente sensible de la actividad de la luciferasa de Gaussia
•Estable: mayor estabilidad de la señal
•Simple: no requiere un luminómetro con inyectores
•Compatible: reactivos de ensayo compatibles con otras luciferasas de Gaussia
• Fácil de automatizar: apto para ensayos de alto rendimiento
• Conveniente: contiene un tampón de lisis celular universal y un reactivo de ensayo de brillo optimizado
•Seguro: permite realizar ensayos no radiactivos. Al utilizarse con los vectores Thermo Scientific Gaussia-Dura Luc, el kit proporciona un sistema de ensayo de reportero bioluminiscente extremadamente sensible para la detección de la actividad de luciferasa secretada o intracelular a partir de la activación del promotor o de la vía, con una estabilidad de señal prolongada. La emisión de luz generada por la reacción de luciferasa (emisión máxima de 485 nm) indica que se transcribió la luciferasa de Gaussia. Esta emisión de luz puede correlacionarse con la cantidad de proteína luciferasa producida, que a su vez es proporcional a la actividad del promotor para la expresión de la luciferasa de Gaussia e indica que la región reguladora del gen diana estaba activa. Esta reacción no requiere trifosfato de adenosina (ATP) ni otros cofactores. El kit incluye tampón de lisis celular, tampón de reacción y sustrato, y puede utilizarse para detectar la actividad de cualquier luciferasa de Gaussia o derivados que utilicen coelenterazina como sustrato.
El kit de ensayo de luminiscencia de luciferasa gaussia requiere: luciferasa gaussia y luminómetro u otro instrumento capaz de monitorear la luminiscencia, como los lectores de microplacas Thermo Scientific Varioskan LUX.
Aplicaciones del kit de ensayo de brillo de luciferasa gaussia:
• Estudios promotores para analizar elementos cis-reguladores y factores trans-actuantes
• Prueba de detección de drogas
• Cribado de ARNi y miARN
• Ensayos multiplexados para estudiar efectos fuera del objetivo
• Ensayos de reporteros de localización de proteínas/vías secretoras
• Análisis de la vía de transducción de señales
Estudios de empalme de ARN. El gen Gaussia-Dura utilizado en los vectores Luc Thermo Scientific Gaussia-Dura se deriva del gen Gaussia de tipo silvestre y proporciona una emisión de luz igual de brillante, pero más estable. El reactivo del kit de ensayo Gaussia Glow produce una reacción de luciferasa Gaussia-Dura con cinética de tipo luminiscente que proporciona una señal de menor intensidad, pero de mayor duración, lo que permite un mayor rendimiento de las muestras. Este ensayo de tipo luminiscente con una señal de luminiscencia prolongada no requiere inyectores de reactivo y se recomienda para luminómetros sin inyectores o para aplicaciones que requieren el procesamiento de muestras por lotes.
Ensayo: Enzima reportera, ensayo de reportero de luciferasa
Células compatibles: células de mamíferos
Método de detección: Bioluminiscencia
Para usar con (equipo): Luminómetro (microplaca)
Formato: placa de 384 pocillos, placa de 96 pocillos
Tipo de etiqueta: etiquetada con enzima
Línea de productos: Pierce™
Cantidad: 1000 reacciones
Sustrato: coelenterazina
Propiedades del sustrato: Sustrato químico
Tipo de sustrato: sustrato de luciferasa
Suficiente para: 1000 ensayos de luciferasa
Objetivo: Luciferasa, Luciferasa Gaussia
Técnica: Quimioluminiscencia mejorada
Promotor: EF-1α
Tipo: Kit de ensayo
Tamaño de la unidad: cada una