Thermo Fisher, 18052019, Ligasa de ADN de E. coli

Thermo Fisher, 18/05/2019, ADN ligasa de E. coli. La ADN ligasa de E. coli cataliza la formación de enlaces fosfodiéster en presencia de β-NAD entre ADN bicatenario con extremos cohesivos hidroxilo 3' y fosfato 5'. Los ácidos nucleicos monocatenarios no son sustratos para esta enzima.
Aplicaciones: Síntesis de ADNc de segunda cadena (1). Alternativa a la ADN ligasa T4 cuando no se requiere la ligadura de extremos romos (2).
Fuente: Purificado a partir de E. coli594(Su-) que contiene λ lisógeno gt4lop-11lig+S7 (3).
Pruebas de rendimiento y calidad: ensayos de endodesoxirribonucleasa y exodesoxirribonucleasa 3' y 5'; eficiencia de ligadura probada.
Definición de unidad:Una unidad es la cantidad de enzima necesaria para dar una ligadura del 50 % del ADN λ digerido con Hind III en 30 minutos a 16 °C en un volumen final de 20 μl que contiene una concentración en los extremos 5' de 0.
12 ´M (300 μg/ml).
Condiciones de reacción unitaria: 18.
8 mM Tris-HCl (pH 8.
3), 90.
6 mM de KCl, 4.
6 mM de MgCl2,3.
8 mM de DTT, 0.
15 mM λ-NAD, 10 mM (NH4)2SO4 en 20 μl durante 1 h a 16 °C.
Tampón compatible: Tampón de reacción 10X
Tipo de producto: ADN ligasa
Cantidad: 100 U
Condición de envío: Aprobado para envío en hielo húmedo o seco
Enzima: Ligasa
Tamaño de la unidad: cada una