Product Description
Pepsina inmovilizada (resina de agarosa) La pepsina inmovilizada de agarosa de Thermo Scientific Pierce consiste en una endopeptidasa ácida (pepsina) que ha sido inmovilizada en resina de agarosa en perlas para permitir la generación y purificación de fragmentos Fab y F(ab')2 a partir de anticuerpos.
La pepsina es una endopeptidasa ácida inespecífica producida en una forma precursora inactiva (pepsinógeno) en la mucosa gástrica de los vertebrados. Existen varias pepsinas, cada una con un peso molecular de 35.000 y un pH óptimo de 1-3; a pH >6, la enzima se inactiva permanentemente. La pepsina posee una amplia especificidad de sustrato. Escinde proteínas preferentemente en los grupos carboxílicos de aminoácidos aromáticos como la fenilalanina, el triptófano y la tirosina. No escinde enlaces que contengan valina, alanina o glicina. La escisión en otros residuos se produce con eficiencia variable.
La pepsina y otras enzimas proteolíticas se utilizan en el análisis de laboratorio de diversas proteínas. La pepsina y la papaína se utilizan a menudo para generar fragmentos de anticuerpos. La papaína se utiliza para escindir los anticuerpos en fragmentos Fab, que contienen un único dominio de unión al antígeno. La pepsina se utiliza para generar fragmentos F(ab')2 eliminando únicamente la porción del dominio Fc más allá de la región bisagra. Los fragmentos F(ab')2 resultantes se componen de dos fragmentos Fab' de unión al anticuerpo, conectados por disulfuros en la región bisagra.
La pepsina inmovilizada puede sustituir a la pepsina libre en cualquier aplicación y presenta la ventaja de eliminar prácticamente la autólisis y la contaminación de la muestra con la proteasa, además de permitir el control de la digestión mediante la eliminación de la pepsina. Además, la pepsina inmovilizada es más estable frente a la desnaturalización inducida por calor, lo que prolonga su actividad. El kit de preparación de F(ab')2 contiene pepsina inmovilizada, otros reactivos necesarios y un protocolo optimizado para la digestión de anticuerpos humanos, de conejo y de ratón.
Forma: Suspensión líquida
Cantidad: 5 mL
Tipo de producto: Pepsina
Tamaño de la unidad: cada una
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