Columnas de proteína A Pierce™ Thermo Fisher, 20356, 1 ml

Columnas Pierce™ de Proteína A, 1 mL. La agarosa de proteína A Thermo Scientific Pierce es una resina de agarosa en perlas de proteína A de capacidad estándar para diversos métodos de purificación por afinidad de anticuerpos. Este producto consta de cinco columnas de 5 mL que contienen 1 ml de resina.
Características de la proteína A agarosa:
•Proteína A nativa: la proteína A inmovilizada es ideal para la purificación de IgG policlonal a partir de suero humano, de conejo, de cerdo, de perro o de gato.
•Resina de agarosa: el soporte es agarosa reticulada al 6 % en perlas (CL-6B), la resina más popular para los métodos de purificación por afinidad de proteínas.
• Inerte y estable: el método de fabricación superior inmoviliza la proteína A mediante enlaces covalentes libres de carga y resistentes a la lixiviación, lo que da como resultado una baja unión no específica y permite múltiples usos sin disminución del rendimiento.
Capacidad estándar: La agarosa de proteína A Pierce contiene una carga normal de proteína A inmovilizada, lo que proporciona una capacidad de unión de 12 a 19 mg de IgG humana/ml de resina (aprox. 6 a 8 mg de IgG de ratón/ml de resina). La agarosa de proteína A Pierce consiste en proteína A nativa purificada, inmovilizada covalentemente en agarosa reticulada de alta calidad al 6 %. Las perlas de agarosa poseen propiedades físicas y químicas que permiten su uso en diversos procedimientos de purificación por afinidad, ya sea en lotes o en columna.
La proteína A es un componente de la pared celular producido por varias cepas de Staphylococcus aureus. El 46.
La proteína de 7 kDa consiste en una sola cadena polipeptídica prácticamente sin carbohidratos. La proteína A nativa contiene cuatro sitios de unión de alta afinidad (Ka = 10^8/mol) capaces de interactuar con la región Fc de anticuerpos de tipo IgG de especies de mamíferos seleccionadas. La función de unión a IgG es óptima a pH 8.
2, pero también se produce una unión eficiente en tampones neutros y fisiológicos (pH 7.
0 a 7.
6).
La proteína A es una proteína derivada de bacterias que se une con alta afinidad y especificidad a la porción Fc de los anticuerpos, especialmente a los de la clase IgG. En comparación con su alternativa (la proteína G), la proteína A ofrece la mayor capacidad de unión para las subclases de IgG de conejos, cerdos, perros y gatos. La proteína A también tiene mayor capacidad de unión para la IgG humana, excepto para la IgG3, a la que se une débilmente. La proteína A también se une débilmente a la IgG1 de ratón y no se recomienda para la mayoría de las aplicaciones con ese isotipo de anticuerpo.
La agarosa de proteína A Pierce se prepara mediante la química de acoplamiento Thermo Scientific AminoLink, que ofrece varias ventajas en comparación con los métodos tradicionales de inmovilización de ligandos. La inmovilización con AminoLink produce la conjugación entre los monómeros de azúcar de las perlas de agarosa y los residuos de lisina nativos de la proteína A mediante enlaces amida simples. A diferencia de la inmovilización típica con bromuro de cianógeno (CNBr), el método AminoLink no introduce ningún grupo químico nuevo que pueda causar una unión inespecífica no deseada y produce una unión estable y prácticamente irreversible. El resultado es una resina de alta capacidad de unión que retiene la proteína A inmovilizada funcional durante múltiples rondas de purificación con anticuerpos.
Propiedades de la agarosa reticulada en perlas al 6% (CL-6B):
• Soporte de estabilidad del pH: 2 a 14 (corto plazo); 3 a 13 (largo plazo)
• Tamaño promedio de partículas: 45 a 165 micrones
• Límite de exclusión: 10.000 a 4.000.000 daltons
• Caudal volumétrico máximo: aprox. 1 ml/minuto (para una columna de 1 cm de diámetro)
• Velocidad lineal máxima: 30 cm por hora
• Presión máxima: menos de 25 psi (1.
5 bar), definida como la caída de presión máxima a través de una columna que la resina puede soportar (Nota: La presión manométrica indicada de un aparato de cromatografía líquida puede estar midiendo la presión total del sistema en lugar de la caída de presión a través de la columna). Objetivo de purificación: anticuerpos IgG
Cantidad: 5 columnas
Suficiente para: Columna de 12 a 19 mg de IgG humana/mL
Tipo de columna: Resina de agarosa, Afinidad
Formato: Columna de centrifugación cónica de 15 ml
Línea de productos: Pierce™
Tipo de producto: Columna
Fase estacionaria: proteína A
Tamaño de la unidad: cada una