Thermo Fisher, 22582, DTNB (reactivo de Ellman) (ácido 5,5-ditio-bis-(2-nitrobenzoico)

El reactivo de Ellman (DTNB) (ácido 5,5-ditio-bis-(2-nitrobenzoico) de Thermo Scientific Pierce Ellman (DTNB) reacciona con grupos sulfhidrilo para producir un producto coloreado, lo que proporciona un método confiable para medir cisteínas reducidas y otros sulfhidrilos libres en solución.
El reactivo de Ellman (ácido 5,5'-ditio-bis-[2-nitrobenzoico]) se utiliza para estimar los grupos sulfhidrilo en una muestra comparándolo con una curva estándar de un compuesto que contiene sulfhidrilo, como la cisteína. Como alternativa, los grupos sulfhidrilo pueden analizarse mediante el coeficiente de extinción de TNB (14150 M⁻¹ cm⁻¹ a 412 nm). El reactivo de Ellman se ha utilizado para otras aplicaciones además de la estimación de sulfhidrilo, como la determinación de alquiltioles por HPLC mediante un procedimiento de derivatización precolumna y el estudio de tioles en el sitio activo de diversas enzimas.
Características del reactivo de Ellman:
•Ensayo de sulfhidrilo: reacciona cuantitativamente con grupos sulfhidrilo libres (reducidos) (—SH) para producir un producto TNB detectable
•Detección colorimétrica: el producto coloreado permite la medición espectrofotométrica en cubetas o microplacas (λmáx. = 412 nm; ε = 14 150/M·cm)
•Método probado: la química bien caracterizada permite la cuantificación de grupos sulfhidrilo de péptidos o proteínas mediante el cálculo del coeficiente de extinción o por comparación con un estándar de cisteína. Propiedades del reactivo
• Nombres alternativos: DTNB, reactivo de Ellman
• Nombre químico: ácido 5,5'-ditio-bis-(2-nitrobenzoico)
• Reactivo hacia: Grupos sulfhidrilo (—SH)
• Fórmula química: C14H8N2O8S2
• Número CAS: 69-78-3
• Peso molecular: 396.
35
• Forma: Polvo cristalino amarillo. El DTNB reacciona con un grupo sulfhidrilo libre para producir un disulfuro mixto y ácido 2-nitro-5-tiobenzoico (TNB). El objetivo del DTNB en esta reacción es la base conjugada (R—S-) de un grupo sulfhidrilo libre. Por lo tanto, la velocidad de esta reacción depende de varios factores: (1) el pH de la reacción, (2) el pKa' del sulfhidrilo y (3) los efectos estéricos y electrostáticos. El TNB es la especie coloreada producida en esta reacción y presenta un alto coeficiente de extinción molar en el rango visible. El coeficiente de extinción molar del TNB, descrito originalmente por Ellman (1959), era de 13 600 M⁻¹ cm⁻¹ a 412 nm y pH 8.
0. Por consiguiente, este valor se ha citado con frecuencia en la literatura. Sin embargo, estudios posteriores han demostrado que el coeficiente de extinción molar se refleja con mayor precisión en un valor de 14.150 M⁻¹ cm⁻¹ a 412 nm. La extinción del TNB no se ve afectada por cambios de pH entre 7 y 100 nm.
6 y 8.
6. Sin embargo, la extinción de TNB es diferente en otros disolventes.
Cantidad: 5 g
Tipo de producto: DTNB
Tamaño de la unidad: cada una