Product Description
La resina de agarosa en perlas de proteína G Thermo Scientific Pierce de 10 ml es una resina de agarosa en perlas de proteína G de alta capacidad para usar en una variedad de métodos de purificación por afinidad de anticuerpos.
Características de la proteína G Plus Agarosa:
•Proteína G: la proteína G inmovilizada es ideal para la purificación de IgG policlonal a partir de suero de ratón, humano, vaca, cabra y oveja, incluidos los isotipos IgG3 humano e IgG1 de ratón.
•Resina de agarosa: el soporte es agarosa reticulada al 6% en perlas (CL-6B), la resina más popular para los métodos de purificación por afinidad de proteínas.
• Inerte y estable: el método de fabricación superior inmoviliza la proteína G mediante enlaces covalentes libres de carga y resistentes a la lixiviación, lo que da como resultado una baja unión no específica y permite múltiples usos sin disminución del rendimiento.
Alta capacidad: esta variedad "Plus" de agarosa Pierce Proteína G presenta una carga densa de proteína G inmovilizada, lo que proporciona una capacidad de unión superior a 20 mg de IgG humana/ml de resina. La agarosa Pierce Proteína G Plus consiste en proteína G recombinante inmovilizada covalentemente a alta densidad sobre agarosa reticulada al 6% de alta calidad (CL-6B). Esta resina es eficaz para la purificación por afinidad de IgG del suero y otros fluidos de numerosas especies de mamíferos. La proteína G es especialmente adecuada para su uso con anticuerpos de ratón (incluida la IgG1 de ratón), además de la mayoría de los isotipos de IgG de muestras humanas, caprinas y ovinas.
La proteína G es una proteína de la pared celular bacteriana originaria de Streptococcus del grupo G y ahora se produce como recombinante en E. coli. Al igual que la proteína A, la proteína G se une a la mayoría de las inmunoglobulinas de mamíferos principalmente a través de sus regiones Fc. La proteína G nativa contiene dos sitios de unión para inmunoglobulinas, así como sitios de unión para albúmina y superficie celular. En la forma recombinante de la proteína G, estos sitios de unión para albúmina y superficie celular se han eliminado para reducir la unión inespecífica durante la purificación de inmunoglobulinas. La proteína G recombinante tiene una masa aproximada de 21.
6 kDa, pero su tamaño aparente por SDS-PAGE es de 31 a 34 kDa. La función de unión a IgG es óptima a pH 5, pero también ocurre eficientemente en condiciones casi neutras (pH 7).
0 a 7.
2).
En comparación con la proteína A, la proteína G se une a un espectro más amplio de subclases de IgG del suero humano, de ratón y de rata. En particular, además de unirse a otros isotipos con la misma eficacia que la proteína A, la proteína G muestra una unión más fuerte a la IgG3 humana, la IgG1 de ratón y los tres isotipos de IgG de rata. Por lo tanto, la proteína G se recomienda generalmente para aplicaciones que involucran estas especies e isotipos de anticuerpos. En otras especies, la proteína G proporciona una mayor capacidad de unión a la IgG de vaca, cabra y oveja, pero se une con menor fuerza que la proteína A a la IgG de cerdo, cobaya, perro y gato.
La Proteína G Plus Agarosa Pierce se prepara mediante la química de acoplamiento Thermo Scientific AminoLink*, que ofrece varias ventajas en comparación con los métodos tradicionales de inmovilización de ligandos. La inmovilización con AminoLink produce la conjugación entre los monómeros de azúcar de las perlas de agarosa y los residuos de lisina nativos de la Proteína A mediante enlaces amida simples. A diferencia de la inmovilización típica con bromuro de cianógeno (CNBr), el método AminoLink no introduce ningún grupo químico nuevo que pueda causar una unión inespecífica no deseada y produce una unión estable y prácticamente irreversible. El resultado es una resina de alta capacidad de unión que retiene la Proteína G inmovilizada funcional durante múltiples rondas de purificación con anticuerpos.
Propiedades de la agarosa reticulada en perlas al 6% (CL-6B):
• Soporte de estabilidad del pH: 2 a 14 (corto plazo); 3 a 13 (largo plazo)
• Tamaño promedio de partículas: 45 a 165 micrones
• Límite de exclusión: 10.000 a 4.000.000 daltons
• Caudal volumétrico máximo: aprox. 1 ml/minuto (para una columna de 1 cm de diámetro)
• Velocidad lineal máxima: 30 cm por hora
• Presión máxima: menos de 25 psi (1.
5 bar), definida como la caída de presión máxima a través de una columna que la resina puede soportar (Nota: La presión manométrica indicada de un aparato de cromatografía líquida puede estar midiendo la presión total del sistema en lugar de la caída de presión a través de la columna). Objetivo de purificación: anticuerpos IgG
Cantidad: 10 mL
Tipo de columna: Resina de agarosa, Afinidad
Formato: Botella
Línea de productos: Pierce™
Tipo de producto: Agarosa
Fase estacionaria: proteína G
Tamaño de la unidad: cada una
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