Thermo Fisher, 4415450, Mezcla maestra para HRM MeltDoctor™

La mezcla maestra MeltDoctor™ HRM de Applied Biosystems™ contiene todos los componentes (excepto la plantilla y los cebadores) formulados para un rendimiento superior de HRM en una amplia gama de dianas genómicas. El análisis de fusión de alta resolución (HRM) es un método de análisis post-PCR que se utiliza para identificar la variación genética en secuencias de ácidos nucleicos. A diferencia de algunas mezclas de la competencia, la mezcla maestra MeltDoctor™ HRM no requiere mezcla adicional antes de su uso y fue desarrollada y optimizada exclusivamente para aplicaciones de HRM.
• Baja fluorescencia de fondo
• Alto brillo en presencia de ADN bicatenario
• Cambio mínimo de temperatura de fusión del ADN debido a la unión del colorante
• Estabilidad térmica para tolerar las condiciones del ciclo de PCR.
• No hay inhibición de la actividad de la polimerasa, lo que resulta en una alta eficiencia de PCR.
• Una mezcla de dNTP que incluye dUTP, que minimiza la contaminación por arrastre al permitir la degradación de amplicones por la uracilo ADN glicosilasa (UDG) en reacciones de PCR posteriores. Realice el análisis de escaneo de mutaciones. El análisis HRM permite escanear mutaciones en genes diana para la identificación de muestras variantes antes del análisis de secuenciación. Como técnica de escaneo de mutaciones, la HRM ofrece ventajas significativas sobre métodos convencionales como la cromatografía líquida de alta resolución desnaturalizante (DHPLC) y la electroforesis en gel de gradiente desnaturalizante (DGGE). En concreto, las ventajas de la HRM para el escaneo de mutaciones incluyen:
• Bajo consumo de reactivos, con poco desperdicio: HRM requiere solo una reacción de PCR de 20 μL para el análisis de cada muestra, lo que elimina la necesidad de solventes HPLC o geles DGGE.
• Flujo de trabajo sencillo y rápido: no se requiere instrumentación adicional tras la amplificación por PCR. Se puede añadir fácilmente un paso de fusión de alta resolución al final del perfil de PCR para un análisis inmediato.
• Optimización rápida: a diferencia de DHPLC, no se requiere optimización térmica
• Bajo consumo de muestra: después del análisis HRM, el producto de PCR se puede utilizar directamente en una reacción de secuenciación de SangerComponentes de calidad
• Sales de magnesio y otros componentes tampón, formulados con precisión para obtener resultados óptimos de HRM.
• ADN polimerasa AmpliTaq Gold™ 360, una ADN polimerasa altamente purificada que proporciona un rendimiento de arranque en caliente, minimizando la formación de productos no específicos y permitiendo que las reacciones se configuren a temperatura ambiente.
• Colorante MeltDoctor™ HRM, una forma estabilizada del colorante de ácido nucleico bicatenario fluorescente SYTO™ 9 desarrollado por Molecular Probes.
Para usar con (equipo): Sistema rápido 7500, Sistema rápido 7900HT, QuantStudio™ 12k Flex, QuantStudio™ 3, QuantStudio™ 5, QuantStudio™ 6 Flex, QuantStudio™ 7, StepOne™, StepOnePlus™, Sistema ViiA™ 7
Objetivo de genotipado: SNP (desconocidos o numerosos), objetivos epigenéticos
Número de reacciones: 5000 reacciones
Polimerasa: ADN polimerasa AmpliTaq Gold 360
Línea de productos: MeltDoctor™
Tipo de producto: Mezcla maestra HRM
Cantidad: 10 x 5 mL
Tipo de muestra: ADN (genómico), ADNc
Técnica: Análisis HRM (fusión de alta resolución), escaneo de mutaciones
Volumen: 50 mL
Método de detección: HRM
Para usar con (aplicación): Genotipado
Forma: Líquido
Rendimiento de PCR rico en GC: alto
Etiqueta o colorante: fusión de alta resolución (HRM), SYTO 9
Método de PCR: qPCR
Velocidad de reacción: rápida
Tamaño de la unidad: cada una