Thermo Fisher, 65-0865-14, colorante de viabilidad fijable eBioscience™ eFluor™ 780

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El colorante de viabilidad fijable eFluor™ 780 es un colorante de viabilidad que permite marcar irreversiblemente células muertas antes de procedimientos de criopreservación, fijación o permeabilización. A diferencia del 7-AAD y el yoduro de propidio, las células marcadas con colorantes de viabilidad fijables pueden lavarse, fijarse, permeabilizarse y teñirse para antígenos intracelulares sin pérdida de intensidad de tinción. Por lo tanto, el uso de colorantes de viabilidad fijables permite excluir células muertas del análisis cuando se estudian dianas intracelulares. Los colorantes de viabilidad fijables pueden utilizarse para marcar células de todas las especies.

El colorante de viabilidad fijable eFluor™ 780 se excita con la línea láser roja (633 nm) y tiene una emisión máxima de 780 nm, detectable con un filtro de paso de banda 780/60 (equivalente a APC-eFluor™ 780 o APC-Alexa Fluor™ 750). Asegúrese de que su instrumento sea capaz de detectar este colorante. Para compensar, se recomienda utilizar una muestra de las células de interés teñidas con el colorante de viabilidad fijable. Si se espera que el porcentaje de células muertas sea inferior al 5 %, se recomienda tomar una pequeña alícuota de células y calentarlas a 65 °C durante 1 minuto; a continuación, colocarlas inmediatamente en hielo durante 1 minuto. Tras este tratamiento, las células muertas por calor se pueden combinar 1:1 con células vivas y teñirlas con el colorante de viabilidad fijable. Nuestras pruebas sugieren que la compensación de la mayoría de los detectores es insignificante, siendo la del PE-Cyanine7 la más alta, inferior al 5 %. Los valores reales de compensación dependerán del instrumento específico de cada investigador, los conjuntos de filtros y la configuración de voltaje del PMT.

El colorante de viabilidad fijable eFluor™ 780 se suministra como una solución prediluida preparada en DMSO anhidro de alta calidad. Debe protegerse de la luz y la humedad. Conservar a -70 °C con desecante. Puede congelarse y descongelarse hasta 20 veces. Dejar que el vial alcance la temperatura ambiente antes de abrirlo.