Thermo Fisher, 77675, proteína G recombinante Pierce™

La proteína G recombinante Thermo Scientific Pierce purificada (sin conjugar) de 50 mg es útil como base para preparar varios tipos de sondas o medios de afinidad para la detección o purificación de anticuerpos de conejo y humanos, especialmente isotipos IgG, en inmunoensayos y protocolos de purificación de anticuerpos.
Características de la proteína G recombinante:
• Contiene dos dominios de unión a Fc por proteína
• Mejor que la proteína A para anticuerpos de ratón (incl. IgG1), humano (incl. IgG3) y rata, cabra y vaca
• Más pobre que la proteína A para cobayas, cerdos, perros y gatos.
• No se une a la IgM, IgD ni a la IgA humanas. La proteína G es una proteína de la pared celular bacteriana aislada de estreptococos del grupo G. La secuenciación del ADN de la proteína G nativa identifica dos dominios de unión a la IgG y sitios para la albúmina y la superficie celular. Los dominios de unión a la albúmina y la superficie celular se han eliminado de la proteína G recombinante para reducir la unión inespecífica y, por lo tanto, puede utilizarse para separar la IgG de las muestras crudas. La unión óptima se produce a pH 5, aunque también es eficaz a pH 7.
0 a 7.
2.
Propiedades de la proteína G recombinante:
• Fuente: E. coli
• Peso molecular: ∼21.600 (PM aparente por SDS-PAGE: 32.000)
• Forma: polvo sin sal
• A280 de 0.
Solución al 1%: 1.
0
• Punto isoeléctrico (pI): 4.
5Dado que la proteína G tiene mayor afinidad que la proteína A por la mayoría de las IgG de mamíferos, puede utilizarse para la purificación de IgG de mamíferos que no se unen bien a la proteína A. La proteína G se une con mucha mayor capacidad que la proteína A a varias subclases de IgG, como la IgG3 humana, la IgG1 de ratón y la IgG2a de rata. Sin embargo, la proteína G no se une a las IgM, IgD e IgA humanas. Las diferencias en las características de unión entre la proteína A y la proteína G pueden explicarse por las distintas composiciones de los sitios de unión de IgG de cada proteína. Las estructuras terciarias de estas proteínas son muy similares, aunque sus composiciones de aminoácidos difieren significativamente.
Existen inconsistencias en las propiedades de unión reportadas de IgG a Proteína G. Las variaciones en los métodos de aislamiento y fabricación de Proteína G pueden afectar la unión de IgG, en parte porque hay diferentes números de sitios de unión de IgG en varias fuentes de Proteína G. Se han realizado estudios de unión utilizando Proteína G nativa y varias formas recombinantes diferentes. Se han utilizado varios métodos de ensayo para determinar la afinidad relativa, incluyendo experimentos de radiomarcaje y técnicas ELISA. Los diferentes ensayos de afinidad pueden explicar algunas de las inconsistencias. Además, existen diferencias de unión significativas cuando se utilizan diferentes tampones. Aproximadamente un 44% más de IgG del suero de rata se unió a Proteína G cuando se utilizó Tampón de Unión de Proteína G en comparación con Tampón Tris 20 mM, pH 7.
5.
Forma: Polvo
Subtipo de proteína: proteína G
Objetivo: Anticuerpos
Línea de productos: Pierce™
Cantidad: 50 mg
Tamaño de la unidad: cada una