Thermo Fisher, 88-8118-40, Kit de tinción de células T reguladoras de ratón eBioscience™ n.° 2

Kit de tinción de células T reguladoras de ratón eBioscience™ n.º 2. El anticuerpo FJK-16s reacciona con Foxp3 de ratón/rata, también conocido como FORKHEAD BOX P3, SCURFIN y JM2; no se ha determinado la reactividad cruzada de este anticuerpo con otras proteínas. Foxp3, una proteína de 49-55 kDa, pertenece a la familia de reguladores transcripcionales forkhead/winged-helix y se identificó como el gen defectuoso en ratones "scurfy" (sf). Se ha demostrado una alta expresión constitutiva del ARNm de Foxp3 en células T reguladoras CD4+CD25+ (células Treg), y la expresión ectópica de Foxp3 en células CD4+CD25- imparte un fenotipo Treg en estas células. La inmunotransferencia con el anticuerpo FJK-16s ha mapeado el epítopo a los aminoácidos 75-125 de la proteína Foxp3 de ratón. En humanos, se ha demostrado que esta región presenta empalme alternativo a nivel de ARNm. Tanto las isoformas con empalme alternativo como las que no lo presentan están presentes en el subgrupo de linfocitos CD4+CD25+. Experimentos preliminares de RT-PCR no han revelado esta isoforma con empalme alternativo en esplenocitos de ratón, lo que sugiere una regulación génica diferente en ratones y humanos. La tinción intracelular de esplenocitos de ratón con FJK-16 utilizando los conjuntos y el protocolo de tinción Foxp3 de ratón revela aproximadamente el 2% del total de esplenocitos en la cepa C57Bl/6 y aproximadamente el 3-5% en la cepa BALB/c. El análisis de citometría de flujo multicolor demuestra que aproximadamente el 90% de las células CD4+CD25+ y el 4% de las células CD4+CD25- se tiñen con FJK-16. Las células B220+, CD11b+, CD11c+ y Ly6G/Gr-1+ no muestran cotinción significativa con FJK-16s. Estos datos concuerdan con un informe reciente que analiza la expresión de Foxp3 mediante un gen knock-in de GFP (Fontenot et al., 2005). FJK-16s presenta reacción cruzada con Foxp3 de rata. Esto se ha demostrado mediante tinción intracelular de Foxp3 y citometría de flujo de esplenocitos de rata, utilizando el mismo método y reactivos que para el tejido de ratón. Tenga en cuenta que los anticuerpos CD4 y CD25 incluidos en este kit solo reconocen los antígenos de ratón. Para la tinción de tejido de rata, utilice (CD4 FITC, n.º de cat. 11-0040 y CD25 PE, n.º de cat. 12-0390). El kit de tinción anti-Foxp3 de ratón ha sido formulado y optimizado para la tinción de esplenocitos de ratón con el anticuerpo monoclonal FJK-16s. No incluye: Controles de isotipo para anti-CD4 (IgG2a de rata, n.º de cat. 11-4321) y anti-CD25 (IgG1 de rata, n.º de cat. 12-4301). Huésped: Rata. Isotipo: IgG2a. Reactividad/especie: Ratón. Aplicación notificada: Tinción intracelular seguida de análisis por citometría de flujo. Formato: Tampón acuoso, azida sódica al 0,09 %, puede contener proteína transportadora/estabilizador.
Cantidad: 1 kit
Para uso con (aplicación): tinción intracelular, citometría de flujo
Línea de productos: eBioscience™
Tipo de producto: Kit de tinción celular
Tamaño de la unidad: cada una