Thermo Fisher, 89949, Kit de centrifugación de proteína G NAb™, 0,2 ml

Kit de centrifugación de proteína G NAb™, 0.
Los kits de centrifugación Thermo Scientific NAb Protein G de 2 ml son prácticos para la purificación por afinidad rápida y a pequeña escala de anticuerpos de diversos tipos de muestras. Cada columna de centrifugación de microcentrífuga precargada con resina proteica inmovilizada permite la purificación rápida de 100-1000 μg de IgG a partir de 25-500 μl de suero u otra muestra. La cantidad real de IgG purificada varía según el tipo de muestra y la columna de centrifugación específica utilizada. Cada kit también incluye suficientes tubos de recolección, tampones y un protocolo optimizado para purificar al menos 10 muestras de anticuerpos.
La agarosa proteína G de Pierce es una resina de afinidad de alta calidad para la purificación de anticuerpos. Consiste en proteína G recombinante inmovilizada covalentemente en perlas de agarosa reticulada al 6% de alta calidad (CL-6B). Esta variedad de resina de afinidad ofrece la combinación más versátil de características cromatográficas para una purificación de alto rendimiento y alta pureza de IgG completa a partir de muestras de suero de mamíferos. Las perlas de agarosa poseen propiedades físicas y químicas adecuadas para diversos sistemas de purificación por afinidad.
Características de la proteína G Agarosa Pierce:
•Proteína G: la proteína G inmovilizada es ideal para la purificación de IgG policlonal a partir de suero de ratón, humano, vaca, cabra y oveja, incluidos los isotipos IgG3 humano e IgG1 de ratón.
•Resina de agarosa: el soporte es agarosa reticulada al 6% en perlas (CL-6B), la resina más popular para los métodos de purificación por afinidad de proteínas.
• Inerte y estable: el método de fabricación superior inmoviliza la proteína G mediante enlaces covalentes libres de carga y resistentes a la lixiviación, lo que da como resultado una baja unión no específica y permite múltiples usos sin disminución del rendimiento.
Capacidad estándar: La proteína G agarosa Pierce contiene una carga normal de proteína G inmovilizada, lo que proporciona una capacidad de unión de 11 a 15 mg de IgG humana/ml de resina. La proteína G es una proteína de la pared celular bacteriana originaria del estreptococo del grupo G y ahora se produce como recombinante en E. coli. Al igual que la proteína A, la proteína G se une a la mayoría de las inmunoglobulinas de mamíferos principalmente a través de sus regiones Fc. La proteína G nativa contiene dos sitios de unión para inmunoglobulinas, además de sitios de unión para albúmina y superficie celular. En la forma recombinante de la proteína G, estos sitios de unión para albúmina y superficie celular se han eliminado para reducir la unión inespecífica durante la purificación de inmunoglobulinas. La proteína G recombinante tiene una masa aproximada de 21.
6 kDa, pero su tamaño aparente por SDS-PAGE es de 31 a 34 kDa. La función de unión a IgG es óptima a pH 5, pero también ocurre eficientemente en condiciones casi neutras (pH 7).
0 a 7.
2).
En comparación con la proteína A, la proteína G se une a un espectro más amplio de subclases de IgG del suero humano, de ratón y de rata. En particular, además de unirse a otros isotipos con la misma eficacia que la proteína A, la proteína G muestra una unión más fuerte a la IgG3 humana, la IgG1 de ratón y los tres isotipos de IgG de rata. Por lo tanto, la proteína G se recomienda generalmente para aplicaciones que involucran estas especies e isotipos de anticuerpos. En otras especies, la proteína G proporciona una mayor capacidad de unión a la IgG de vaca, cabra y oveja, pero se une con menor fuerza que la proteína A a la IgG de cerdo, cobaya, perro y gato.
La agarosa de proteína G Pierce se prepara mediante la química de acoplamiento AminoLink de Thermo Scientific, que ofrece varias ventajas en comparación con los métodos tradicionales de inmovilización de ligandos. La inmovilización con AminoLink produce la conjugación entre los monómeros de azúcar de las perlas de agarosa y los residuos de lisina nativos de la proteína A mediante enlaces amida simples. A diferencia de la inmovilización típica con bromuro de cianógeno (CNBr), el método AminoLink no introduce ningún grupo químico nuevo que pueda causar una unión inespecífica no deseada y produce una unión estable y prácticamente irreversible. El resultado es una resina de alta capacidad de unión que retiene la proteína G inmovilizada funcional durante múltiples rondas de purificación con anticuerpos.
La proteína G agarosa Pierce es eficaz para la purificación por afinidad de IgG del suero y otros fluidos de numerosas especies de mamíferos. La proteína G es especialmente adecuada para su uso con anticuerpos de ratón (incluida la IgG1), además de la mayoría de los isotipos de IgG de muestras humanas, caprinas y ovinas.
Propiedades de la agarosa reticulada en perlas al 6% (CL-6B):
• Soporte de estabilidad del pH: 2 a 14 (corto plazo); 3 a 13 (largo plazo)
• Tamaño promedio de partículas: 45 a 165 micrones
• Límite de exclusión: 10.000 a 4.000.000 daltons
• Caudal volumétrico máximo: aprox. 1 ml/minuto (para una columna de 1 cm de diámetro)
• Velocidad lineal máxima: 30 cm por hora
• Presión máxima: menos de 25 psi (1.
5 bar), definida como la caída de presión máxima a través de una columna que la resina puede soportar (Nota: La presión manométrica indicada de un aparato de cromatografía líquida puede estar midiendo la presión total del sistema en lugar de la caída de presión a través de la columna). Más datos del producto
•Uso de proteínas de unión a anticuerpos para la purificación de anticuerposDescripción: Kit de purificación por centrifugación de proteína G NAb, 0.
2 ml
Objetivo de purificación: anticuerpos IgG
Cantidad: Kit de 10 columnas
Tipo de columna: Resina de agarosa, Afinidad
Formato: Kit, Columna de centrifugación para microcentrífuga
Línea de productos: NAb™
Tipo de producto: Kit de centrifugado
Fase estacionaria: proteína G
Tamaño de la unidad: cada una