Thermo Fisher, 89951, Kit de centrifugación de proteína L NAb™, 0,2 ml

Kit de centrifugación de proteína L NAb™, 0.
Los kits de centrifugación Thermo Scientific™ NAb™ Protein L de 2 mL son prácticos para la purificación por afinidad rápida y a pequeña escala de anticuerpos de diversos tipos de muestras. Cada columna de centrifugación de microcentrífuga precargada con resina proteica inmovilizada permite la purificación rápida de 100-1000 μg de IgG a partir de 25-500 μl de suero u otra muestra. La cantidad real de IgG purificada varía según el tipo de muestra y la columna de centrifugación específica utilizada. Cada kit también incluye suficientes tubos de recolección, tampones y un protocolo optimizado para purificar al menos 10 muestras de anticuerpos.
La agarosa Pierce Protein L consiste en proteína L recombinante inmovilizada covalentemente en perlas de agarosa reticulada al 6% de alta calidad (CL-6B). Esta variedad de resina ofrece la combinación más versátil de características cromatográficas para una purificación de alto rendimiento y alta pureza de las inmunoglobulinas diana. Las perlas de agarosa poseen propiedades físicas y químicas adecuadas para diversos sistemas de purificación por afinidad.
Características de Pierce Protein L Agarosa:
•Proteína L: la proteína L inmovilizada es ideal para la purificación selectiva de anticuerpos humanos y de ratón que tienen cadenas ligeras kappa.
•Resina de agarosa: el soporte es agarosa reticulada al 6% en perlas (CL-6B), la resina más popular para los métodos de purificación por afinidad de proteínas.
• Inerte y estable: el método de fabricación superior inmoviliza la proteína L mediante enlaces covalentes libres de carga y resistentes a la lixiviación, lo que da como resultado una baja unión no específica y permite múltiples usos sin disminución del rendimiento.
•Capacidad estándar: la proteína L agarosa Pierce tiene una carga normal de proteína L inmovilizada, lo que proporciona una capacidad de unión de 5 a 10 mg de IgG humana/ml de resina. Aplicaciones:
• Purificar anticuerpos monoclonales y policlonales que se unen mal a la proteína A o proteína G agarosa
• Purificar anticuerpos monoclonales de sobrenadantes de cultivo suplementados con suero bovino
• Ensayos de inmunoprecipitación y co-inmunoprecipitación de proteína L
• Purificar fragmentos ScFv y Fab que contienen cadenas ligeras kappa. La proteína L es una proteína de unión a inmunoglobulina (36 kDa) que se origina en la bacteria Peptostreptococcus magnus, pero que ahora se produce de forma recombinante en E. coli. A diferencia de la proteína A y la proteína G, que se unen principalmente a través de las regiones Fc (es decir,
La proteína L, como se conoce a las inmunoglobulinas (es decir, cadena pesada), se une a las Ig mediante interacciones con las cadenas ligeras. Dado que ninguna parte de la cadena pesada participa en la interacción de unión, se une a una gama más amplia de clases de Ig que las proteínas A o G. Se une a representantes de todas las clases de Ig, incluyendo IgG, IgM, IgA, IgE e IgD. Los fragmentos variables de cadena sencilla (ScFv) y los fragmentos Fab también se unen a la proteína L.
A pesar de su amplia capacidad de unión con respecto a las clases de Ig, la proteína L no es una proteína universal que se una a las inmunoglobulinas. Su unión a las inmunoglobulinas se limita a aquellas que contienen cadenas ligeras kappa (es decir,
Por ejemplo, la cadena kappa del dominio VL. En humanos y ratones, predominan las cadenas ligeras kappa. Las inmunoglobulinas restantes poseen cadenas ligeras lambda. Además, la proteína L solo se une eficazmente a ciertos subtipos de cadenas ligeras kappa. Por ejemplo, se une a los subtipos humanos VkI, VkIII y VkIV, pero no al subtipo VkII. La unión de las inmunoglobulinas de ratón se limita a las que poseen cadenas ligeras VkI.
Dados estos requisitos específicos para una unión eficaz, la principal aplicación de la proteína L inmovilizada es la purificación de anticuerpos monoclonales de ascitis o sobrenadante de cultivo que contienen la cadena ligera kappa. La proteína L es extremadamente útil para la purificación de anticuerpos monoclonales que contienen VLk del sobrenadante de cultivo, ya que no se une a las inmunoglobulinas bovinas presentes en el suplemento de suero del medio. Además, la proteína L no interfiere con el sitio de unión del anticuerpo al antígeno, lo que la hace útil para ensayos de inmunoprecipitación, incluso con IgM.
La agarosa para proteína L Pierce se prepara mediante la química de acoplamiento AminoLink de Thermo Scientific, que ofrece varias ventajas en comparación con los métodos tradicionales de inmovilización de ligandos. La inmovilización con AminoLink produce la conjugación entre los monómeros de azúcar de las perlas de agarosa y los residuos de lisina nativos de la proteína A mediante enlaces amida simples. A diferencia de la inmovilización típica con bromuro de cianógeno (CNBr), el método AminoLink no introduce ningún grupo químico nuevo que pueda causar una unión inespecífica no deseada y produce una unión estable y prácticamente irreversible. El resultado es una resina de alta capacidad de unión que retiene la proteína L inmovilizada funcional durante múltiples rondas de purificación con anticuerpos.
La agarosa Proteína L de Pierce es una resina de afinidad versátil para la purificación de isotipos de IgG de mamíferos que contienen cadenas ligeras kappa específicas. La Proteína L es especialmente adecuada para aislar anticuerpos monoclonales IgG VkI de ratón e IgG VkI, VkIII y VkIV humanos.
Propiedades de la agarosa reticulada en perlas al 6% (CL-6B):
• Soporte de estabilidad del pH: 2 a 14 (corto plazo); 3 a 13 (largo plazo)
• Tamaño promedio de partículas: 45 a 165 micrones
• Límite de exclusión: 10.000 a 4.000.000 daltons
• Caudal volumétrico máximo: aprox. 1 ml/minuto (para una columna de 1 cm de diámetro)
• Velocidad lineal máxima: 30 cm por hora
• Presión máxima: menos de 25 psi (1.
5 bar), definida como la caída de presión máxima a través de una columna que la resina puede soportar (Nota: La presión manométrica indicada de un aparato de cromatografía líquida puede estar midiendo la presión total del sistema en lugar de la caída de presión a través de la columna). Más datos del producto
•Uso de proteínas de unión a anticuerpos para la purificación de anticuerposDescripción: Kit de purificación por centrifugación de proteína L NAb, 0.
2 ml
Objetivo de purificación: anticuerpos Ig
Cantidad: Kit de 10 columnas
Tipo de columna: Resina de agarosa, Afinidad
Formato: Kit, Columna de centrifugación para microcentrífuga
Línea de productos: NAb™
Fase estacionaria: proteína L
Tamaño de la unidad: cada una