Kit de clonación Thermo Fisher, A11098, Bac-to-Bac™ C-His TOPO™

Kit de clonación Bac-to-Bac™ C-His TOPO™. El sistema de expresión de baculovirus Bac-to-Bac™ es un método eficiente para producir baculovirus y lograr una alta expresión proteica en células de insecto. Se basa en la generación de virus recombinantes mediante transposición específica en E. coli, en lugar de recombinación homóloga en células de insecto. ¡Nuevos vectores pFastBacTOPO™! Expresión proteica rápida y fiable. El sistema de expresión de baculovirus Bac-to-Bac™ es más rápido y sencillo que la expresión tradicional con baculovirus, y mantiene altos niveles de expresión proteica. Bac-to-Bac™ se basa en la generación de baculovirus recombinantes mediante transposición específica en E. coli, en lugar de recombinación homóloga en células de insecto. El sistema de expresión de baculovirus Bac-to-Bac™ goza de gran prestigio en la literatura académica. ¡Aproximadamente 100 citas anuales desde el año 2000! Los sistemas tradicionales de baculovirus requieren la purificación y amplificación de un sobrenadante viral inicial de bajo título. Esto requiere un ensayo de placa que requiere mucho tiempo. Sin embargo, el vector pFastBac™ de Bac-to-Bac™ se recombina con el bácmido parental en células competentes de E. coli DH10Bac™ para formar un bácmido de expresión. Transfecte el bácmido en células de insecto para una rápida producción de un alto título de partículas de baculovirus recombinantes puros en la primera transfección. Ahorrará semanas de tiempo valioso. Recopile una reserva de baculovirus P2 puro el día 10 sin necesidad de un tedioso ensayo de placa (véase la Figura 1). Alta expresión, cribado sencillo: pFastBac™ utiliza el potente promotor de polihedrina para generar altos niveles de expresión en diversas líneas celulares de insecto, como las células Sf9, Sf21 y High Five™. Nuevas incorporaciones: Los vectores pFastBac de Bac-to-Bac™ ahora también están disponibles como vectores pFastBacTOPO™. Los vectores pFastBacTOPO™ son vectores Blunt™ TOPO™ y se suministran con Mach1™-T1R E. coli para facilitar la clonación y la propagación de pFastBac⁄GOI. Los nuevos vectores permiten:
• Amplifique su gen de interés (GOI) con una enzima PCR de máxima fidelidad como Accuprime™ Pfx SuperMix.
• ¡TOPO™ clona el producto de PCR de extremo romo en el nuevo vector en solo 5 minutos!
• Visualice las colonias 8 horas después de la siembra en placas selectivas de ampicilina porque las células de E. coli Mach1™-T1R tienen un tiempo de duplicación más rápido en comparación con otras cepas de clonación estándar.
Con el kit de clonación o expresión Bac-to-Bac™ C-His TOPO™, puede producir una proteína de fusión His C-terminal con un sitio de escisión TEV para purificarla con resinas quelantes de níquel (Sistema de Purificación ProBond™ de Invitrogen) y generar una proteína nativa con la popular proteasa AcTEV™ de Invitrogen. ¡Este es el único vector de Invitrogen que contiene un sitio de escisión TEV C-terminal! Los nuevos vectores combinan la tecnología de clonación TOPO™ con las reconocidas características de expresión de baculovirus Bac-to-Bac™ para facilitar la clonación y lograr una expresión proteica de alto nivel. Los vectores pFastBacTOPO™ se ofrecen como kits de clonación y expresión. Resistencia bacteriana a antibióticos: Ampicilina (AmpR), Gentamicina (GmR).
Línea celular: High Five™, Sf21, Sf9
Tipo de célula: célula de insecto
Método de clonación: TOPO romo
Mecanismo de expresión: Expresión en células de insectos
Sistema de expresión: Baculovirus
Para uso con (aplicación): Expresión de proteínas, producción de vacunas virales
Número de reacciones: 20 reacciones
Línea de productos: Bac-to-Bac™, TOPO™
Tipo de producto: Kit de clonación
Promotor: Poliedrina
Etiqueta de proteína: Su etiqueta (6x)
Cantidad: 20 Reacciones
Agente de selección (eucariota): ampicilina, gentamicina
Vector: pFastBac/CT-TOPO
Tamaño de la unidad: cada una