Kit de construcción de bibliotecas de ADNc CloneMiner™ II de Thermo Fisher, A11180, Invitrogen™

Kit de construcción de bibliotecas de ADNc CloneMiner™ II de Invitrogen™. El kit de construcción de bibliotecas de ADNc CloneMiner™ II es un kit CloneMiner™ de segunda generación que permite la construcción rápida de bibliotecas de ADNc altamente representativas sin clonación con enzimas de restricción. Esta innovadora tecnología de construcción de bibliotecas combina la transcriptasa inversa SuperScript™ III con la tecnología de clonación Gateway™, lo que permite el descubrimiento de clones completos previamente inalcanzables. El kit también evita el uso de reacciones de ligadura ineficientes y que requieren mucho tiempo, lo que agiliza la construcción de bibliotecas y ofrece una mejor representación.
El kit de construcción de bibliotecas de ADNc CloneMiner™ II garantiza:
• Títulos primarios altos
• Tamaños de insertos promedio grandes
• El mayor porcentaje de genes de longitud completa
• Clonación altamente eficiente de ADNc en múltiples vectores de destino sin necesidad de digestión con enzimas de restricción ni ligadura. Cómo funciona el kit CloneMiner™ II:
• Alto rendimiento de ADNc completo: El kit CloneMiner™ II contiene SuperScript™ III para generar altos rendimientos de ADNc. La transcriptasa inversa (RT) SuperScript™ III, una mutación patentada de la RT SuperScript™ II, es activa a 50 °C y tiene una vida media de 220 minutos. Además, presenta una mutación puntual que reduce la actividad de la ARNasa H, disminuyendo así la degradación del ARN durante la síntesis de la primera cadena y aumentando el porcentaje de genes completos.
La tecnología de clonación Gateway™ evita la clonación con enzimas de restricción: La construcción de bibliotecas está mediada por la Tecnología Gateway™, un sistema de recombinación sitio-específico que elimina el uso de enzimas de restricción y ligasa en la clonación. Cada inserto de ADNc está flanqueado por sitios de recombinación att específicos (añadidos durante la síntesis del ADNc) que se recombinan con los sitios att complementarios presentes en los vectores donantes Gateway™ para crear clones de entrada. Posteriormente, los clones de entrada se recombinan con los vectores de expresión Gateway™ para crear clones de expresión, lo que reemplaza eficazmente el uso de enzimas de restricción y ligasa. Los clones resultantes mantienen la orientación y el marco de lectura originales, lo que permite el análisis funcional de genes completos y bibliotecas completas.
¿En qué se diferencia este kit del kit CloneMiner™ original?
• El nuevo kit incorpora un protocolo simplificado.
• Para garantizar altos rendimientos de ADNc, la transcriptasa inversa SuperScript™ II (RT) ha sido reemplazada por la transcriptasa inversa SuperScript™ III.
• Para permitir la configuración de la reacción con menos pasos de pipeteo, Gateway™ BP Clonase™ Enzyme Mix ha sido reemplazado por Gateway™ BP Clonase™ II Enzyme Mix, que contiene enzimas y tampón en una sola mezcla.
Cepa bacteriana o de levadura: DH10B
Método de clonación: Puerta de enlace
Tipo de producto final: Biblioteca de ADNc
Para usar con (aplicación): Bibliotecas de ADNc y construcción de bibliotecas
Línea de productos: CloneMiner™
Tipo de producto: Kit de preparación de biblioteca
Cantidad: 1 Kit
Transcriptasa inversa: SuperScript™ III
Vector: pDONR222
Formato: Kit
Tamaño de la unidad: cada una