Thermo Fisher, A11339, Sistema de expresión secretada Bac-to-Bac™ HBM TOPO™

Sistema de expresión secretado Bac-to-Bac™ HBM TOPO™. La expresión de baculovirus Bac-to-Bac es un método eficiente para producir baculovirus para la expresión proteica de alto nivel en células de insecto. Se basa en la generación de virus recombinantes mediante transposición específica en E. coli, en lugar de recombinación homóloga en células de insecto. El sistema de expresión pFastBac HBM TOPO presenta:
Expresión de proteínas secretadas: El vector Bac-to-Bac HBM TOPO contiene la señal de secreción de melitina de abeja (HBM) para permitir la expresión de proteínas secretadas. Dado que las glicoproteínas no pueden glicosilarse en ausencia de una señal de secreción, este vector se recomienda para la expresión de glicoproteínas.
•Flexibilidad: el vector Bac-to-Bac HBM TOPO contiene una etiqueta His C-terminal con un sitio de escisión TEV para permitir una fácil purificación de proteínas etiquetadas con His con resinas quelantes de níquel (como el sistema de purificación Invitrogen ProBond) y la generación de proteínas nativas con la ayuda de la proteasa AcTEV de Invitrogen.
Clonación rápida, cribado sencillo: la tecnología de clonación Blunt TOPO permite la clonación de productos de PCR de extremo romo en el vector pFastBac TOPO en cinco minutos. Además, el kit de expresión pFastBac TOPO incluye Mach1-T1RE. coli, que permite la visualización de colonias ocho horas después de la siembra en placas selectivas para ampicilina gracias a su tiempo de duplicación más rápido en comparación con otras cepas de clonación estándar.
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•Alta eficiencia de transfección con el reactivo de transfección ExpiFectamine Sf: los kits de expresión Bac-to-Bac TOPO ahora vienen con el reactivo de transfección ExpiFectamine Sf de próxima generación para una transfección de ADN eficiente en células de insectos utilizando protocolos rápidos y flexibles.
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Bácmido de expresión que ahorra tiempo: Con el sistema Bac-to-Bac, el casete de expresión del vector pFastBac se recombina con el bácmido parental en células competentes de E. coli DH10Bac para formar un bácmido de expresión. Posteriormente, el bácmido se transfecta en células de insecto para la producción de partículas de baculovirus recombinantes.
•Sensibilidad de detección de colonias: El bácmido progenitor en DH10BacE. coli contiene un segmento del gen lacZa. Este gen se altera al transponer el casete de expresión al bácmido, lo que permite la selección azul/blanca de recombinantes para facilitar la identificación de colonias recombinantes.
•Alta expresión de proteínas: el vector pFastBac utiliza el fuerte promotor de polihedrina para generar altos niveles de expresión en una variedad de líneas celulares de insectos, como las células Sf9, Sf21 y High Five.
Método de clonación: Blunt TOPO™
Mecanismo de expresión: expresión celular
Línea de productos: Bac-to-Bac™, TOPO™
Etiqueta de proteína: Su etiqueta (6x)
Cantidad: 20 Reacciones
Agente de selección (eucariota): Ninguno
Sistema de expresión: Baculovirus
Promotor: Poliedrina
Tipo: Sistema de expresión de proteínas de Pichia
Tamaño de la unidad: cada una