Thermo Fisher, A13282, Sistema de mutagénesis dirigida GeneArt™

Sistema de Mutagénesis Dirigida GeneArt™. El Sistema de Mutagénesis Dirigida GeneArt™ ofrece un método vanguardista, sencillo, práctico y altamente eficiente para generar mutaciones en una construcción diana in vitro en menos de tres horas. Este sistema reemplaza al popular Sistema de Mutagénesis Dirigida GeneTailor™ y ha sido completamente rediseñado para estar a la vanguardia de los productos comerciales de mutagénesis dirigida disponibles actualmente en el mercado. Este producto lleva nuestra tecnología de mutagénesis al siguiente nivel. Nota: El sistema no incluye una enzima PCR; debe adquirirse por separado. La enzima recomendada para este kit es la ADN polimerasa AccuPrime™ Pfx.
•Potente: realiza sustituciones, eliminaciones o inserciones de hasta 12 nucleótidos en plásmidos de hasta 14 Kb.
• Eficiente: le permite obtener el mutante deseado la primera vez; más del 90 % de mutantes correctos para un plásmido de 3 Kb
•Rápido: obtenga su ADN plasmídico mutado en menos de 3 horas con el protocolo de manipulación simple y mínima.
Versátil: utilice plásmidos de diversos tamaños y ADN aislado de cualquier origen, sin necesidad de vectores especializados, cepas hospedadoras ni sitios de restricción. Creación sencilla de los mutantes deseados. La creación de mutantes con el sistema de mutagénesis dirigida GeneArt™ se basa en las propiedades inherentes de la ADN metilasa, la ADN polimerasa de alta fidelidad, las enzimas de recombinación y la endonucleasa nativa McrBC de E. coli. Simplemente incorpore la o las mutaciones deseadas (hasta 12 nucleótidos) en los cebadores y, tras la PCR, la recombinación y la transformación, obtendrá vectores con solo las mutaciones deseadas con una eficiencia de hasta el 90 %. El vector molde al que se añaden las mutaciones puede aislarse de cualquier origen y tener un tamaño de hasta 14 kb. Para crear construcciones completas o unir grandes fragmentos de ADN no relacionado, consulte nuestro Kit de Clonación y Ensamblaje GeneArt™ Seamless (cat. n.° A13288) o nuestro Sistema de Ensamblaje Genético de Alto Orden GeneArt™ (cat. n.° A13286). Protocolo de Mutagénesis Optimizado. El Sistema de Mutagénesis Dirigida GeneArt™ se ha optimizado para mayor eficiencia y simplicidad. Los pasos de metilación y amplificación del ADN se combinan en una sola reacción, sin necesidad de una digestión in vitro con DpnI. Tras la metilación y la amplificación, una reacción de recombinación in vitro de 10 minutos de los productos de PCR amplificados aumenta la producción de colonias de 3 a 10 veces, lo que resulta en una mayor eficiencia de la mutagénesis. Una transformación final del ADN mutado en células de E. coli DH5α™ digiere cualquier ADN parental metilado, dejando únicamente el producto de la reacción de mutagénesis intacto y sin metilar. No se requieren pasos de purificación ni digestiones adicionales. Se pueden seleccionar colonias individuales al día siguiente para verificar las mutaciones. Cepa bacteriana o de levadura: DH5α
Tipo de célula: E. coli químicamente competente
Eficiencia: 90%
Para usar con (aplicación): clonación fluida y ensamblaje genético
Capacidad de mutagénesis: mutagénesis de un solo sitio
Longitud de la región mutagenizada (hasta): 12 nucleótidos
Tipo de mutación: deleciones, inserciones, sustituciones
Plásmido: Plásmidos de hasta 14 kb
Línea de productos: GeneArt™
Tipo de producto: Sistema de mutagénesis dirigida
Cantidad: 16 reacciones
Tamaño de la unidad: cada una